產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Pim激酶抑制劑(TP-3654)
英文名稱:TP-3654
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
TP-3654是第二代Pim激酶抑制劑,對Pim-1和Pim-3的Ki值分別為5和42nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1361951-15-6 純度:99.71% 分子量:418.46 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)ELISA試劑盒 ,英文名: HDAC1 ELISA Kit
小鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISA檢測試劑盒Mouseplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit 96T/48T
人抗丙氨酰NA合成酶,細胞質(AARS)抗體免疫試劑盒 Human ai alanyl-NA syhetase,cytoplasmic(AARS)aibody ELISA kit
rabbitTissuePolypeptideAigen,TPAELISAKit兔子組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞CYTOCHROMEC蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次
Humanβ2-Glycoprotein1aibodyIgA,β2-GP1AbIgAELISA試劑盒人β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1AbIgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素28(IL-28)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-28 ELISA Kit
大鼠角化細胞內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)ELISA檢測試劑盒Ratkeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISAKit 96T/48T
人Toll樣受體7(TLR7)免疫試劑盒 Human TLR7 ELISA Kit
英文名稱MouseglialfibrillaryacidicproteinELISAKit小鼠神經(jīng)膠質纖維酸性蛋白(GFAP)規(guī)格:96T/48T
TNFBETA蛋白免疫共沉淀分析試劑盒5次
Rabbitmaixmetalloproteinase3,MMP-3ELISA試劑盒兔子基質金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬氧化酶(XOD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human keratinocyte aocrine factor (KAF) ELISA Kit / amphiregulin (AR) ELISA Kit 人角化細胞內分泌因子(KAF)ELISA試劑盒/雙調蛋白(AR)ELISA試劑盒
Porcinephospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit 豬磷酸化細胞外信號調節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforAlphaNAG(HumanAlphaN-acetylglucosaminidase)ELISAKit人αN已酰氨基葡糖苷酶規(guī)格:48T/96T
血液結構型內皮細胞一氧化氮合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性比色法定量檢測試劑盒20次
PlaHumanVitaminC,VCELISAKit植物維(VC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Pim激酶抑制劑(TP-3654)SERCA1 ATPase 英文名稱: 肌漿網(wǎng)鈣ATP酶1/內質網(wǎng)鈣ATP酶1抗體 0.2ml
EID3 英文名稱: E1A樣分化抑制因子3抗體 0.2ml
癌易感基因相關蛋白2 anti-PALB2 0.2ml
Anti-Spindlin 1/SPIN-2/FITC 熒光素標記Spindlin 1/SPIN-2 形成相關基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-NFKB p65(Thr505) 磷酸化細胞核因子抗體 規(guī)格 0.1ml
ER- Beta (Estrogen receptor beta)peptide 雌激素受體(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)