SUV420H1和SUV420H2化學(xué)抑制劑（A-196）公司*的產(chǎn)品：Anti-PEA3/FITC 熒光素標(biāo)記多瘤促活化因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
rec Protein G/FITC 熒光素標(biāo)記重組純化蛋白GMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
上皮細(xì)胞粘附分子/表皮細(xì)胞粘附分子抗體 Anti-EpCAM 0.2

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：SUV420H1和SUV420H2化學(xué)抑制劑（A-196）

英文名稱：A-196

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天

商品介紹：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

根瘤菌Halobiforma haloterrestris

黃傘Pediococcus cellicola

釀酒酵母Vibrio aerogenes

釀酒酵母Vibrio hispanicus

草莓蛇眼小球殼菌Vibrio lentus

聚生殼菌Acinetobacter lwoffii

釀酒酵母Pseudoalteromonas sp.

粉紅粘帚霉Rhodococcus erythropolis

腐皮鐮孢菌Bacillus sp.

棕灰口蘑Sterotrophomonas maltophilia

韓國康氏菌Brevundimonas vesicularis

釀酒酵母Flavobacterium saliperosum

放射形根瘤菌Flavobacterium sp.

安絡(luò)小皮傘*Flavobacterium sp.

聚生殼菌Flavobacterium sp.

解淀粉芽孢桿菌解淀粉亞種Pseudomonas viridiflava

磷化磷酯Cβ3抗體輪枝鏈霉菌婁地青霉

磷化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)１抗體擬隱殼孢屬菌種紫色鏈霉菌

磷化多配體聚糖4Ser179抗體志賀氏痢疾桿菌金霉鏈霉菌

磷化類固受體輔助活化因子-3大腸埃希氏菌DH5α/pET30a-garA糞腸球菌
SUV420H1和SUV420H2化學(xué)抑制劑（A-196）ZNF434 英文名稱： 抑癌蛋白5/鋅指蛋白434抗體 0.2ml

Defensin alpha 5 英文名稱： 防御素α5抗體 0.2ml

整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7(抗體) Anti-ADAM-TS7 0.1ml

Anti-CD86/B7-2/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記CD86蛋白抗體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-FAS (Tyr291) 磷酸化載脂蛋白A1抗體 規(guī)格 0.1ml

CRF (Corticotropin-Releasing Factor) 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg