商品介紹:
XL228是多靶點(diǎn)的酪氨酸激酶抑制劑,對(duì)Bcr-Abl,Aurora A,IGF-1R,Src和Lyn的IC50值分別為5,3.1,1.6,6.1,2nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):898280-07-4 純度:99.22% 分子量:437.54 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:酪氨酸激酶抑制劑(XL228)
英文名稱:XL228
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
假單胞菌Pseudomonas aeruginosa大鼠葉(FA)
黃肉座菌Pseudomonas aeruginosa大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)
樟疫霉Pseudomonas aeruginosa大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)
解脂假絲酵母Pseudomonas aeruginosa大鼠N端前腦鈉(NT-proBNP)
香菇Pseudomonas aeruginosa大鼠N端前腦鈉(NT-proBNP)
冷海水黃桿菌Pseudomonas aeruginosa大鼠糖皮質(zhì)類固受體(GR)
乳白居真菌細(xì)菌Pseudomonas aeruginosa大鼠糖皮質(zhì)類固受體(GR)
Paraburkholderia contaminansPseudomonas aeruginosa大鼠黃體生成釋放激(LHRH)
弗雷德里克斯堡假單胞菌Pseudomonas aeruginosa大鼠黃體生成釋放激(LHRH)
雞傷寒沙門氏菌Pseudomonas aeruginosa大鼠8異前列腺(8-iso-PG)
煙色紅曲霉Pseudomonas aeruginosa大鼠8異前列腺(8-iso-PG)
乳克魯維酵母Pseudomonas aeruginosa大鼠γ干擾誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)
天花板節(jié)桿菌Pseudomonas aeruginosa大鼠γ干擾誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)
玫瑰小雙孢菌Pseudomonas aeruginosa大鼠基質(zhì)衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)
Leucostoma niveumPseudomonas aeruginosa大鼠基質(zhì)衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)
匿名曲霉Pseudomonas aeruginosa大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)
庚型肝炎多聚蛋白抗體深綠木霉人類胚胎干細(xì)胞BG01V(干細(xì)胞庫保藏)
尿激型纖溶原激活因子受體抗體暗紅蓋牛肝菌人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)(干細(xì)胞庫保藏)
血小板源性生長因子BB抗體細(xì)極鏈格孢人類胚胎干細(xì)胞H9(干細(xì)胞庫保藏)
胰島促進(jìn)因子抗體胰十二指腸同源異型盒蛋白雪白-灰綠曲霉小鼠神經(jīng)干細(xì)胞NE-4C(干細(xì)胞庫保藏)
酪氨酸激酶抑制劑(XL228)錫那羅州弧 分離液
棲土曲霉 聚蔗糖70
阿舒多囊霉 野漆樹苷
蘇云金芽孢桿蠟螟亞種 去氧膽酸鹽瓊脂(DC)
瑟氏泰勒蟲(武都株) 葡聚糖
大豆慢生根瘤 百兩金A
圍小叢殼 葡聚糖
黑曲霉 葡聚糖
異配囊接霉 氧代川南亭堿
兔出血癥病 DEAE葡聚糖
無藥品 霉和酵母總數(shù) 苔黑葡萄糖苷;地衣二葡萄糖苷
生黑孢鏈霉 MR-VP培養(yǎng)基
土生隱球酵母 藍(lán)色葡聚糖2000
鏈霉 -7-O-葡萄糖苷
新城疫病 烯葡聚糖凝膠S-1000 SF