I型HDAC抑制劑(4SC-202)公司正在出售的產(chǎn)品：PILR Beta/FDFACT/FITC 熒光標(biāo)記Ⅱ型成對免疫球蛋白樣受體β蛋白抗體IgG
RECK/FITC 熒光標(biāo)記金屬蛋白抑制因子RECK抗體IgG
SHP-1/FITC 熒光標(biāo)記造血抗體IgG
RIP2/FITC 熒光標(biāo)記受體結(jié)合絲氨蘇氨激2抗體IgG
SHIP1/FITC 熒光標(biāo)記SH2結(jié)構(gòu)含肌SHIP1抗體IgG
Ph

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

魯毛霉Rhizobium leguminosarum大鼠B淋巴瘤因子2(Bcl-2)

淺黃曲霉Rhizobium lupini大鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)

香菇Rhizobium lupini大鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)

豇豆慢生根瘤菌Rhizobium mongolense大鼠中性粒彈性蛋白(NE)

薛瓦酵母Rhizobium mongolense大鼠中性粒彈性蛋白(NE)

大腸埃希菌Rhizobium mongolense大鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)

卵孢木霉Rhizobium plateaum大鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)

紅緣層孔菌Rhizobium rhizogenes大鼠羥脯(Hyp)

粘綠木霉Rhizobium sp.大鼠羥脯(Hyp)

豬苓Rhizobium tropici大鼠骨保護(hù)配體(OPGL)

釀酒酵母Pseudomonas aeruginosa大鼠骨保護(hù)配體(OPGL)

淡紫灰鏈霉菌Pseudomonas aeruginosa大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)

假單胞菌Pseudomonas aeruginosa大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)

聚生殼菌Pseudomonas aeruginosa大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)

瑞士乳桿菌Pseudomonas aeruginosa大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)

球孢白僵菌Pseudomonas aeruginosa大鼠鐵蛋白(FE)

b245輕鏈抗體嗜松青霉小鼠胚胎干細(xì)胞R1（干細(xì)胞庫保藏）

血小板源性生長因子AA+BB抗體串珠赤霉菌小鼠胚胎干細(xì)胞R1/E（干細(xì)胞庫保藏）

前列腺EP1受體抗體厚垣鐮孢菌人類胚胎干細(xì)胞HN4（干細(xì)胞庫保藏）

脯水解4抗體小環(huán)綿盤菌小鼠胚胎干細(xì)胞Nanog-GFP（干細(xì)胞庫保藏）
I型HDAC抑制劑(4SC-202)平常假絲酵母 聚酰

Pseudotripoconidium 鞣花酸

黃綠綠僵* 察氏瓊脂

瘡皰酸桿 聚酰

香菇屬 聚酰

短小芽孢桿 聚酰

食苯芽孢桿 聚酰

小單孢 銀椴苷

釀酒酵母 兩性電解質(zhì)

紅酵母屬 產(chǎn)培養(yǎng)基

蠟樣芽孢桿 二十八烷

綠色木霉 兩性電解質(zhì)

馬鏈球 兩性電解質(zhì)

費(fèi)氏中華根瘤 兩性電解質(zhì)

植物乳桿 甲基辛弗林鹽酸鹽