Notch信號傳導抑制劑(FLI-06)公司*的產品：Anti-PRAS40/AKT1 substrate 1/FITC 熒光素標記蛋白激酶AKT底物1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
dog IgG (親和純化) 狗IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 10mg
丙型肝炎病毒-NS3抗體 Anti-HCV-NS3 0.2ml
Mo

產品屬性：

中文名稱：Notch信號傳導抑制劑(FLI-06)

英文名稱：FLI-06

產品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研

商品介紹：

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調控；

⑤細胞分化及其調控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

單胞菌Lactobacillus rhamnosus

釀酒酵母Lactobacillus fermentum

黑曲霉Lactobacillus plantarum

甲基營養(yǎng)型芽胞桿菌Enterococcus faecalis

茯苓菌Enterococcus faecalis

可可鏈霉菌阿蘇亞種Enterococcus faecalis

愛德華氏菌屬Clostridium acetobutylicum

谷棒桿菌Ⅰ型Clostridium acetobutylicum

棕粉色野野村氏菌Clostridium acetobutylicum

產黃纖維單胞菌Clostridium acetobutylicum

解淀粉芽胞桿菌植物亞種Clostridium acetobutylicum

產短桿菌Clostridium acetobutylicum

稻黑孢霉Clostridium acetobutylicum

鮑氏桑黃Clostridium pasteurianum

釀酒酵母Azotobacter chroococcum

中國蜜環(huán)菌Azotobacter chroococcum

枯草芽孢桿菌深黑變種Bacillus│subtilis var. aterrimus 質量規(guī)格：UV法含量測定

鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規(guī)格：>98%,BR

大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規(guī)格：含量測定
Notch信號傳導抑制劑(FLI-06)STK40 英文名稱： 絲酸/蘇酸蛋白激酶40抗體 0.2ml

ETV2 英文名稱： ETS相關蛋白71抗體 0.2ml

XIAP相關因子1抗體 anti-XAF1 0.2ml

Anti-TSLP/FITC 熒光素標記淋巴細胞生成素-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-IKK beta(S474) 磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體 規(guī)格 0.1ml

active Caspase 3(caspase-3 p12 subunit) 活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)