聯(lián)系電話
上海仁捷生物科技有限公司
中級會(huì)員·9年
- 聯(lián)系人：
- 霍經(jīng)理
- 電話：
- 021-60346444
- 手機(jī)：
- 17302193538
- 地址：
- 上海市楊浦區(qū)鐵嶺路32號1519-10室
- 個(gè)性化：
- www.shrjkit.com
- 網(wǎng)址：
- www.shrjbio.com
掃一掃訪問手機(jī)商鋪
ELISA試劑盒 變質(zhì)是ELISA實(shí)驗(yàn)中比較常見的問題，那么，ELISA試劑盒變質(zhì)是因?yàn)槭裁茨?？是什么影響了ELISA試劑盒質(zhì)保？一旦變質(zhì)會(huì)有什么影響呢？今天上海恒遠(yuǎn)為大家詳細(xì)分析下。
一、方法學(xué)的影響
ELISA測定模式包括以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法，其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時(shí)差所引起的不gong平競爭等因素的影響，結(jié)果重復(fù)性較差，質(zhì)量較難控制。
二、試劑因素
不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量*一致，即使是通過批批檢的項(xiàng)目其檢測結(jié)果也存在差異，因此必須選擇和訂購長批號的試劑，并保證保存條件。嚴(yán)格執(zhí)行這一標(biāo)準(zhǔn)可以避免因試劑批號改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評估試劑的復(fù)雜過程，并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性；對于效期短、使用率低的試劑，應(yīng)當(dāng)小量分裝，每次使用則取分裝部分即可，避免反復(fù)凍融造成試劑的失效。
三、樣本因素
標(biāo)本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素，前者包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等，后者包括標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)間過長、標(biāo)本凝固不全、冷凍標(biāo)本的反復(fù)凍融等。
四、操作因素
ELISA操作步驟復(fù)雜，操作不當(dāng)將引起較大的誤差。加樣、溫育、洗滌、顯色、比色。
五、灰區(qū)的設(shè)置
通常情況下，ELISA定性實(shí)驗(yàn)以“陽性”和“陰性”來報(bào)告結(jié)果，兩者間有一條分界線被稱為“陽性判斷值”(cut-off value，CO值)，這是定性免疫測定結(jié)果報(bào)告的依據(jù)。
六、標(biāo)本復(fù)查
ELISA手工檢測過程復(fù)雜，影響因素較多，即使室內(nèi)質(zhì)控在控，也可能因孔間差異而造成結(jié)果的差異，因此加大復(fù)查力度是保證結(jié)果準(zhǔn)確性的可靠方法，比如對HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項(xiàng)目的可疑、弱陽性標(biāo)本及少見模式的檢測結(jié)果進(jìn)行復(fù)查。
七、常表示結(jié)果的常用方法
a.定性測定
b.半定量測定 結(jié)果一般以滴度表示。
c.定量測定 即用已知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測定，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果以量或單位表示。在ELISA定量檢測中每一塊反應(yīng)板都必須繪制相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
