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    上海研生實業(yè)有限公司
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    瘰疬分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

    參  考  價面議
    具體成交價以合同協(xié)議為準

    產(chǎn)品型號50T

    品       牌其他品牌

    廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

    所  在  地上海市

    更新時間:2020-09-29 10:50:40瀏覽次數(shù):312次

    聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)
    CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
    分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
    供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
    貨號 YSP6961 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
    主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
    瘰疬分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒所謂實時熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。

    實驗過程:
    一、瘰疬分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準備
    1. DNA模板
    2.產(chǎn)品僅用于科研對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
          10×PCR buffer             5μl
          dNTP mixl                 4μl
          引物1(10pM)               2μl
          引物2(10PM)              2μl
          Taq酶(2U/μl)            1μl
          DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
         加ddH2O至               50 μl
         視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
    3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
    參數(shù)規(guī)格:
    產(chǎn)品名稱:瘰疬分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
    英文名稱:Mycobacterium scrofulaceum
    產(chǎn)品規(guī)格:50T
    產(chǎn)品運輸:低溫運輸
    產(chǎn)品保存:-20℃保存
    產(chǎn)品有效期:一年
    產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
    運輸及保存
    低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
    自備試劑
    DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。
    本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

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    產(chǎn)品及特點:
    1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
    2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
    3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
    4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
    5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
    以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
    Amygdalin整合素αM型檢測試劑盒20mg

    分子篩, 5 Å(40-60目,氣相、液相色譜柱) 質(zhì)量規(guī)格:40-60目,氣相、液相色譜柱 Molecular sieves, 5 Å 月桂基鹽胰蛋白胨肉湯/LST肉湯/LST Broth各種食品中大腸菌群近似值(MPN)測定250克國產(chǎn)/進口

    Artemether別嘌醇相關(guān)物質(zhì)B標準品規(guī)格:規(guī)格:人胎盤堿性酶(ALPP)Polyclonal Antibody 0.2ml

    人微量白蛋白尿(ALB)GFRAL  膠質(zhì)細胞系源性神經(jīng)營養(yǎng)子受體α1樣蛋白抗體規(guī)格:96T/48T規(guī)格:200mgCC趨化子受體2檢測試盒20mg人肺腺癌細胞,HCC78細胞1x10^6cells

    Stevenleaf整合素β4結(jié)合蛋白檢測試劑盒20mg

    鹽法舒地爾(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 Fasudil hydrochloride

    Curcumin別嘌醇相關(guān)物質(zhì)A標準品規(guī)格:規(guī)格:人去唾液糖蛋白受體1(ASGPR 1)Polyclonal Antibody 0.2ml

    人抗核抗體(ANA)GHDC  GHDC蛋白抗體規(guī)格:96T/48T規(guī)格:10mgCC趨化子受體5檢測試盒20mg人肺腺癌細胞,NCIH441細胞1x10^6cells

    異硫熒光素5mg

    十五(分析標準品,≥99.5%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.5%(GC) Pentadecanoic Acid

    Mouse Antirabbit ascites  小鼠抗兔IgG抗血清進口、原裝心型脂肪結(jié)合蛋白檢測試盒10gHuman/人Elisa試盒480660

    6羧基熒光素琥珀酰亞(單一化合物)5mg

     SH-SY5Y(人神經(jīng)母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2

    Mouse Antirat IgG Whole serum  小鼠抗大鼠IgG抗血清現(xiàn)貨供應(yīng)BPDEDNA加合物檢測試盒25gHuman/人Elisa試盒480660

    6羧基熒光素琥珀酰亞(單一化合物)5mg

    神經(jīng)(分析標準品,≥99.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.0%(GC) Nervonic acid

    50ml尿白三烯檢測試盒5mg孕檢測試盒folliclestimulatinghormone
    瘰疬分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒莪術(shù)二;Germacr1(10)e CAS號: 13657686 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

    莪術(shù); CAS號: 17910097 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

    1,3O二咖??鼘?Cynari CAS號: 1182349 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

    1,5O二咖??鼘?Cynari CAS號: 30964137? 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

    1,8二羥蒽醌;1,8Dihydr CAS號: 117102 規(guī)格: 100mg 訂購|咨詢

    二丹參Ⅰ;Dihydrotanshi CAS號: 87205990 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

    莪術(shù);Curcumol CAS號: 4871970 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

    二楊梅素;Dihydromyricet CAS號: 27200120 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

    二槲皮素;Taxifolin CAS號: 480182 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

    丹葉大黃素;Rhapontigenin CAS號: 500652 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

    大豆異黃 ;Isoflavone CAS號: 574129 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

    冬綠苷;Gaultherin CAS號: 490675 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

    地黃苷D;RhMannioside D CAS號: 81720083 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

    地黃苷A;RhMannioside A CAS號: 81720050 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

    γ倒捻子素;γ Mangostin CAS號: 31271075 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
    使用方法:
    一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
    1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
    2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
    3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
    4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
    5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
    6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
    7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
    二、樣品DNA的制備
    8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
    9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
    三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行)
    10. 如果只做1次重復(fù),則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
    11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。

     

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