少量細胞標(biāo)本的制備實驗步驟

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少量細胞標(biāo)本的制備實驗步驟

(1)取材：少量細胞連同培養(yǎng)基一起移人離心管中，800r／min離心5min。細胞沉淀加4％的多聚甲醛，輕輕混勻4℃固定1h。PBS緩沖液漂洗，800r／min離心5min，連續(xù)3次。將微量移液管的塑料槍頭過火焰，使其成為封閉的錐形管，將細胞沉淀(約200μl)移入管內(nèi)，加5μl新鮮人血漿，輕輕混勻后，然后加入2．5％戊二醛(pH 7. 2～7．3。0．1moL／L PBS緩沖液配制)100μl，再輕輕混勻，4℃靜止4h。離心條件同前。刀片切去槍頭的末端，用細針挑出細小的細胞團塊，PBS緩沖液漂洗多次。

(2)固定：1％鋨酸固定2h，PBS緩沖液漂洗、丙酮脫水，包埋，染色，切片自然干燥后觀察。
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