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如何判定elisa試劑盒價(jià)格定性和定量的結(jié)果

時(shí)間:2018/10/25閱讀:638
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      elisa試劑盒價(jià)格的結(jié)果判定分為定性和定量?jī)煞N ,在間接法和夾心法ELSIA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競(jìng)爭(zhēng)法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。那么兩類結(jié)果如何判斷呢?

(1)間接法和夾心法
     這類反應(yīng)的定性結(jié)果可以用肉眼判斷。目視標(biāo)本也無色或近于無色者判為陰性,顯色清晰者為陽性。但在ELSIA中,正常人血清反應(yīng)后??沙霈F(xiàn)呈色的本底,此本底的深淺因試劑的組成和實(shí)驗(yàn)的條件不同而異,因此實(shí)驗(yàn)中必須加測(cè)陰性對(duì)照。陰性對(duì)照的組成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判斷結(jié)果時(shí),更宜用顯色深于陰性對(duì)照作為標(biāo)本陽性的指標(biāo)。

     目視法簡(jiǎn)捷明了,但頗具主觀性。在條件許可下,應(yīng)該用比色計(jì)測(cè)定吸光值,這樣可以得到客觀的數(shù)據(jù)。先讀出標(biāo)本(sample,S)、陽性對(duì)照(P)、和陰性對(duì)照(N)的吸光值,然后進(jìn)行計(jì)算。計(jì)算方法有多種,大致可分為陽性判定值法和標(biāo)本與陰性對(duì)照比值法兩類。

(2)競(jìng)爭(zhēng)法
     在競(jìng)爭(zhēng)法ELISA中,陰性孔呈色深于陽性孔。陰性呈色的強(qiáng)度取決于反應(yīng)中酶結(jié)合物的濃度和加入競(jìng)爭(zhēng)抑制物的量,一般調(diào)節(jié)陰性對(duì)照的吸光度在1.0-1.5之間,此時(shí)反應(yīng)zui為敏感。
競(jìng)爭(zhēng)法ELISA不易用自視判斷結(jié)果,因肉眼很難辨別弱陽性反應(yīng)與陰性對(duì)照的顯色差異,一般均用比色計(jì)測(cè)定,讀出S、P和N的吸光值。計(jì)算方法主要也有兩種,即陽性判定值法和抑制率法。

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