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ELISA試劑盒批發(fā)操作除了掌握基本步驟外,還需要知道一些技巧性的知識,以下是本公司資深技術(shù)通過多年經(jīng)驗為大家整理的實驗匯總:
1.包衣液的選擇,碳酸鹽緩沖液通常選擇9。6。但有時因為測試需求,數(shù)據(jù)包緩沖溶液是一種特殊的原料可采用中性包裝。應注意以下原則:蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合,取決于在固相的疏水性基團和疏水性相互作用的載體表面蛋白分子的結(jié)構(gòu),物理吸附是非特異性的,蛋白分子量,等電點,大集中,小分子蛋白蛋白質(zhì)通常含有疏水基團越多,所以更容易吸附在固相載體表面。測試也有很強的理論于實踐,看zui后一個可以應用到我們的測試。除了剛才提到的9。6碳酸鹽緩沖液常用的涂料溶液,和磷酸鹽緩沖液和7-8 7。2 -緩沖。
2.包被是非常重要的,蛋白質(zhì)濃度,原來的性質(zhì)是否降解,抗體,使你可以識別,從而節(jié)省抗原是非常重要的,我做的重組蛋白,他嚴厲警告我必須在冰浴是緩慢的融化是真理。有一些涂層可不是蛋白質(zhì),生物素和脂類或小分子,我們的裝修之前涂,我簡要如下: 2460親和素-生物素抗生物素蛋白涂層:*載體,加入生物素標記的,這種鍍膜的方法均勻,牢固,已擴大應用于各種抗原定量測定。脂質(zhì):可以在有機溶劑(如酒精)孔加入溶解后,打開冰箱隔夜或冷干,待酒精揮發(fā),在固體表面上進行自然干燥的固體脂質(zhì)。小分子必須依靠和大的載體蛋白偶聯(lián)可以固定在固體載體上。
3.關(guān)閉:以下包之后是無關(guān)的蛋白質(zhì)溶液濃度高,ELISA試劑盒涂層工藝。隨函附上使大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些空隙,和干擾物質(zhì)的免疫排斥和吸附步驟。常用的密封:0。05% - 0。5%牛血清白蛋白;10%或1%明膠牛血清;脫脂奶粉,價格相對低廉,可用于高濃度(5%~10%);和一些罕見的使用各種動物血清(主要是為了消除類似的蛋白和酪蛋白等干擾)。但到底選擇什么,根據(jù)實驗的具體實踐。
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