蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase IV (CA4)

CA-IV; CAIV; Car4; RP17; Retinitis Pigmentosa 17(Autosomal Dominant); Carbonate dehydratase IV

型號：GOY-01D2240

酶與激酶

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：24.3kDa

實(shí)際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Ser20~Ser220 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

饑餓素-O-乙?；D(zhuǎn)移酶(GOAT)重組蛋白英文名稱：Recombinant Ghrelin-O-Acyltransferase (GOAT)OACT4; MBOAT4; Membrane Bound O-Acyltransferase Domain Containing Protein 4物種：Human，人

毒堿棕櫚?；D(zhuǎn)移酶2(CPT2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Carnitine Palmitoyltransferase 2, Mitochondrial (CPT2)CPTASE; Carnitine O-Palmitoyltransferase 2; Carnitine palmitoyltransferase II物種：Human，人

鈉/鉀離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶β4肽(ATP1b4)重組蛋白英文名稱：Recombinant ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 4 Polypeptide (ATP1b4)X,K-ATPase subunit beta-m; X/potassium-transporting ATPase subunit beta-m物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

黑曲霉 Aspergillus niger動(dòng)物雙歧桿菌 Bifidobacterium animalis

角叉菜膠;卡拉膠 質(zhì)量規(guī)格：BR Carrageenan

 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum三葉草根瘤菌 Rhizobium trifolii

?；悄?/span>-3-酯二鈉鹽 質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR Taurocholate-3-sulfate,disodium salt

 桿菌屬 Lactobacillus sp.植物桿菌 Lactobacillus plantarum

十一 質(zhì)量規(guī)格：>98% Zinc undecylenate

 RL95-2(人子宮內(nèi)膜細(xì)胞)STO(小鼠胚成纖維細(xì)胞)

FLAG peptide 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR FLAG peptide

 根瘤菌香菇 Lentinula edodes

羽扇豆鹼(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%,標(biāo)準(zhǔn)品 lupanine

 TT(人甲狀腺導(dǎo)管細(xì)胞)人胃耐藥株

普盧利;普利 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR Prulifloxacin

 溶藻弧菌 Vibrio alginolyticus6-10B, 人鼻咽細(xì)胞系

普盧利;普利(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Prulifloxacin

 瓜笄霉異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala

5-HIAA;5-羥基吲哚-3-乙(血清素代謝物) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%,進(jìn)分 5-HIAA

碳酸酐酶Ⅳ(CA4)重組蛋白大鼠人活化素A(ACV-A)免疫試劑盒

2 ug pENTR-GFP pENTR-GFP 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

人血管緊張素Ⅱ(2-7)免疫試劑盒

TPY瓊脂培養(yǎng)基 TPY Agar Medium 250g

10次 WGA 糖蛋白分離試劑盒 Glycoprotein Isolation Kit （WGA） -20℃保存

50mL CM交換介質(zhì) CM Medium 常溫干燥封袋保存

人氧化(COX)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

50T 霍亂弧菌CTX基因PCR檢測試劑盒   低溫運(yùn)輸，-20℃保存

牛血清白蛋白(BSA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

50T 乙型肝炎病毒cccDNA PCR測定試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

人谷脫羧自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝