蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Extracellular Signal Regulated Kinase 2 (ERK2)

MAPK1; P38; P40; ERK2; ERT1; MAPK2; P42MAPK; P42-MAPK; PRKM1; PRKM2; P41; P41mapk; P41-mapk; Mitogen-Activated Protein Kinase 1; Mitogen-activated protein kinase 2

型號：GOY-01D2031

信號轉(zhuǎn)導(dǎo)

酶與激酶

腫瘤免疫

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞膜, 細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量：42.8kDa

實(shí)際分子量：43kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Tyr23~Ser358 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：7.0

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

纈氨酰tRNA合成酶2(VARS2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Valyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (VARS2)VARS2L, VARSL; ValRS; Valyl-tRNA Synthetase Like; Valine tRNA Ligase 2,Mitochondrial; Valyl-tRNA synthetase物種：Mouse，小鼠

環(huán)加氧酶2(COX 2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Cyclooxygenase-2 (COX 2)PGG/HS; PGHS2; PHS2; HCox2; PTGS2; Prostaglandin Endoperoxide Synthase 2; Prostaglandin G/H Synthase And Cyclooxygenase; Prostaglandin H2 synthase 2物種：Rat，大鼠

血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶10(ADAMTS10)重組蛋白英文名稱：Recombinant A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 10 (ADAMTS10)WMS; ADAM-TS10物種：Rat，大鼠

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

卵巢英文名稱：CoC2（懸?。?/span>

白藜蘆醇（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品 Resveratrol

 家貓皮膚成纖維樣細(xì)胞英文名稱：CatS2

瑞替加濱堿 質(zhì)量規(guī)格：含量>99.0% Retigabine Base

 鼠李糖發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口

林 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR Ribavirin

 人結(jié)腸耐耐藥株英文名稱：HCT116/L

瑞替加濱 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>95%,鹽 Retigabine

 抗生Ⅶ號培養(yǎng)基/抗生素7號培養(yǎng)基/Antibiotic Agar NO.7孢噻圬鈉等藥品的效價測定250克國產(chǎn)/進(jìn)口

林（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ribavirin

 Thormley氏氨雙水解酶培養(yǎng)基/氨雙水解酶試驗(yàn)用培養(yǎng)基/AD細(xì)菌氨水解試驗(yàn)，用于假單胞菌屬鑒別；弧菌的氨試驗(yàn)5克國產(chǎn)/進(jìn)口

核糖 質(zhì)量規(guī)格：≥630µg/mg,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) Ribostamycin Sulfate

 3% NaC1蔗糖發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口

利福布丁 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR Rifabutin

 大鼠支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

利福布?。?biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>95%,標(biāo)準(zhǔn)品 Rifabutin

細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶2(ERK2)重組蛋白大鼠地銨  英文名稱：Dequalinium chloride   規(guī)格：100mg   保存：-20℃，避光

格  英文名稱：Bemegride   規(guī)格：100mg   保存：-20℃，避光

羥丙酯（對羥基甲酸丙酯）  英文名稱：Propyl p-hydroxybenzoate (propyl p-hydroxybenzoate)   規(guī)格：100mg   保存：-20℃，避光

特  英文名稱：Ola Mitter   規(guī)格：100mg   保存：-20℃，避光

爾  英文名稱：The effects of trapidil   規(guī)格：50mg   保存：-20℃，避光

對氨基  英文名稱：Pasiniazid   規(guī)格：100mg   保存：-20℃，避光

磺酸鈉  英文名稱：Sodium Paeonol Sulfonate   規(guī)格：100mg   保存：-20℃，避光

β-胡蘿卜素  英文名稱：Beta carotene   規(guī)格：100mg   保存：-20℃，避光

富馬侖  英文名稱：Isopropiram fumarate   規(guī)格：100mg   保存：-20℃，避光

布通  英文名稱：Trepibutone   規(guī)格：50mg   保存：-20℃，避光

甲氧沙  英文名稱：Methoxsalen   規(guī)格：100mg   保存：-20℃，避光

丙胺雜質(zhì)A  英文名稱：Furapromide impurity A   規(guī)格：100mg   保存：-20℃，避光