蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Ribonuclease A3 (RNASE3)

Rnase-A3; RnaseA3; ECP; RNS3; Ribonuclease,RNase A Family 3; Eosinophil Cationic Protein

型號：GOY-01D2013

酶與激酶

感染免疫

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：Cytoplasmic granule

預(yù)測分子量：18.4kDa

實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Trp33~Phe155 (Accession # P70709) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：10.1

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

腺苷酸環(huán)化酶6(ADCY6)重組蛋白英文名稱：Recombinant Adenylate Cyclase 6 (ADCY6)ATP pyrophosphate-lyase 6; Adenylate cyclase type VI; Ca(2+)-inhibitable adenylyl cyclase物種：Human，人

肝素酶(HPSE)重組蛋白英文名稱：Recombinant Heparanase (HPSE)HPA; HPR1; HPSE1; HSE1; Endo-glucoronidase;物種：Mouse，小鼠

Ⅻ組磷脂酶A2(PLA2G12)重組蛋白英文名稱：Recombinant Phospholipase A2, Group XII (PLA2G12)PLA2G12A; sPLA2-XII; GXII sPLA2; Group XIIA secretory phospholipase A2; Phosphatidylcholine 2-acylhydrolase 12A物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

人子宮頸上皮細胞培養(yǎng)基100mL

康唑（標準品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標準品 Ketoconazole

 大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL

吉他,柱晶白 質(zhì)量規(guī)格：效價≥1300U/MG,BR Kitasamycin

 改良麥康凱基礎(chǔ) (CT-SMAC) 規(guī)格： 250g 用途： 用于大腸埃希氏菌0157:H7/NM的選擇性分離培養(yǎng)(GB/T4789.36-2008)。

來那度/雷利度 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%,BR Lenalidomide

 馬鈴薯葡萄糖 (PDA) 規(guī)格： 250g 用途： 供霉菌和酵母菌計數(shù)及分離培養(yǎng)

拉坦前列腺素 質(zhì)量規(guī)格：含量>99.0% Latanoprost

 HtrA絲氨肽酶1(HTRA1)重組蛋白英文名稱：Recombinant HtrA Serine Peptidase 1 (HTRA1)

來那度/雷利度（標準品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品 Lenalidomide

 低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF1α)重組蛋白英文名稱：Recombinant Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha (HIF1a)

 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng) Letrozole

 角蛋白4(KRT4)重組蛋白英文名稱：Recombinant Keratin 4 (KRT4)

（標準品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品 Letrozole

 髓鞘少突膠質(zhì)細胞糖蛋白(MOG)重組蛋白英文名稱：Recombinant Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein (MOG)

醋亮瑞林 質(zhì)量規(guī)格：>97%.BR Leuprorelin Acetate （Leuprolide Acetate）

核糖核酸酶A3(RNASE3)重組蛋白大鼠雙重輪絲鏈霉菌   抑制革蘭氏陰性細菌，部分酵母和絲狀真菌

大腸埃希氏菌(大腸桿菌)   產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌（ETEC）。血清型：O78：K80。供研究，分析檢測，質(zhì)量控制。人畜共患，經(jīng)口、消化道傳染

鮑曼不動桿菌   用于分析檢測和教學(xué)，耐藥菌株，對多粘菌素E敏感

枯草芽孢桿菌枯草亞種   產(chǎn)葡聚糖酶

善變副球菌   

德氏乳桿菌乳酸亞種（萊氏曼氏乳桿菌）   維生素B12（氰鈷胺素）檢測

里氏木霉   produces endoglucanase 葡聚糖酶

大腸埃希氏菌(大腸桿菌)   帶有YEplac112穿梭質(zhì)粒

Burkholderiaxenovorans   模式菌株

Aurantimonascoralicida   模式菌株

長雙歧桿菌   研究，。

施氏假單胞菌   模式菌株、分類研究，減少堿類

芽孢桿菌   藥效試驗，質(zhì)量控制菌株