蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Myosin Light Chain Kinase (MYLK)

KRP; MLCK108; MLCK210; MSTP083; MLCK; smMLCK; MYLK1; MLCK1; Telokin; Myosin Light Chain Kinase, Smooth Muscle, deglutamylated form; Kinase-related protein

型號：GOY-01D1865

酶與激酶

心腦血管

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量：52.6kDa

實(shí)際分子量：58kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Val33~Ala485 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：9.5

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

碳酸酐酶Ⅶ(CA7)重組蛋白英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase VII (CA7)CA-VII; CAVII; Carbonate dehydratase VII物種：Rat，大鼠

基質(zhì)金屬9(MMP9)重組蛋白英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)GELB; Gelatinase B; CLG4B; CLG4-B; 92 KDa Gelatinase; 92kDa Type IV Collagenase物種：Rabbit，兔

基質(zhì)金屬2(MMP2)活性蛋白英文名稱：Active Matrix Metalloproteinase 2 (MMP2)CLG4; CLG4A; MMP-II; MONA; TBE-1; PEX; Gelatinase A; 72kDa Gelatinase; 72kDa Type IV Collagenase物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體 phospho-APP/ABPP(Thr668) 0.1ml

鉀離子通道蛋白家族成員1樣蛋白抗體 KCNE1L 0.2ml

alpha 1能受體抗體 ADRA1/ADRA1B/alpha 1 Adrenergic Receptor 0.1ml

軸突生長誘向因子G2抗體 Netrin G2 0.2ml

八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子6抗體 43379 0.2ml

磷酸化BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體 phospho-Bid (Ser65) 0.1ml

磷酸化三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體 phospho-ATP citrate lyase(Ser455) 0.1ml

鈣1抗體 Calpain 1 0.1ml

皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子抗體 CCL27/CTACK 0.2ml

泛素連接酶蛋白CHFR抗體 CHFR 0.2ml

磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25C抗體 Phospho-cdc25C (Ser216) 0.1ml

磷酸化細(xì)胞周期檢測點(diǎn)激酶1抗體 phospho-CHEK1(Ser317) 0.1ml

肌球蛋白輕鏈激酶(MYLK)重組蛋白大鼠北京棒桿菌   抗噬菌體變異株，產(chǎn)L-

Sphingomonastrueperi   模式菌株

Marivitalitorea    模式菌株

產(chǎn)氣腸桿菌   模式菌株。水質(zhì)檢測，質(zhì)量控制菌株。

Sphingobiumjaponicum   模式菌株

牙齦卟啉單胞菌   

意大利青霉   

釀酒酵母   油酸缺陷型。單倍體

Lysobacterdaejeonensis   模式菌株

西伯利亞庫特氏菌   模式菌株

盲腸腸球菌   模式菌株

馬鏈球菌獸疫亞種   超高分子量透明質(zhì)酸

食酸菌   分析檢測