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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>蛋白>>重組蛋白/RP>> 甘露糖苷酶α1A類成員1(MAN1A1)重組蛋白人
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產(chǎn)品型號(hào)
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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-15 13:27:24瀏覽次數(shù):137次
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貨號(hào) | GOY-01D1663 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Mannosidase Alpha Class 1A Member 1 (M |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
泛素羧基端酯酶L1(UCHL1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L1 (UCHL1)PARK5; PGP9.5; Uch-L1; Neuron cylasmic protein 9.5; Ubiquitin thioesterase L1; Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase isozyme L1物種:Mouse,小鼠
體亞基α4(PSMa4)重組蛋白英文名稱:Recombinant Proteasome Subunit Alpha Type 4 (PSMa4)HC9; PSC9; Macropain subunit C9; Multicatalytic endopeptidase complex subunit C9; Proteasome component C9; Proteasome subunit L物種:Human,人
亮氨酰氨基肽酶(LAP)重組蛋白英文名稱:Recombinant Leucine Aminopeptidase (LAP)LAPEP, LAP3; PEPS; Peptidase S; Leucyl Aminopeptidase; Cytosol aminopeptidase; Proline aminopeptidase; Prolyl aminopeptidase物種:Human,人
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
甘露糖苷酶α1A類成員1(MAN1A1)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D1663 |
英文名稱:Recombinant Mannosidase Alpha Class 1A Member 1 (MAN1A1)
HUMM3; HUMM9; MAN9; Mannosyl-Oligosaccharide 1,2-Alpha-Mannosidase IA; Mannosidase alpha class 1A member 1; Processing alpha-1,2-mannosidase IA
型號(hào):GOY-01D1663
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測(cè)分子量:68.1kDa
實(shí)際分子量:-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)
片段與標(biāo)簽:Ile322~Glu653 with N-terminal His and GST Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:>95%
等電點(diǎn):-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
細(xì)胞色素P450 2C9抗體 CYP2C9 0.1ml
磷酸化結(jié)蛋白抗體 phospho-DES (Thr76/Thr77) 0.1ml
磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 Phospho-EGFR (Thr678) 0.1ml
絲裂原活化蛋白激酶1抗體 ERK2/MAPK1 0.1ml
富含的激酶2抗體 FAK2/PYK2 0.1ml
硫氧還蛋白過(guò)氧化物酶Ⅱ/巰基抗氧化蛋白抗體 Peroxiredoxin 2/PRXII 0.1ml
磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體 phospho-eIF4EBP1/4EBP1(Ser64) 0.1ml
抗赤抗體 Gibberellins 0.1ml
腦鈉素/利鈉肽抗體 BNP 0.2ml
細(xì)胞維甲酸結(jié)合蛋白2抗體 CRABP2 0.1ml
Ras樣蛋白A+B抗體 RALA+RALB 0.2ml
10抗體 PRSS10/TMPRSS2 0.2ml
甘露糖苷酶α1A類成員1(MAN1A1)重組蛋白人Glabridin 光甘草定59870-68-720mg
L-Sorbose L-山梨糖87-79-6100mg
Martin Broth Modified 改良馬丁培養(yǎng)基250g瓶
Phoxim 辛磷14816-18-310mg
3M 乙酸鈉(pH=5.2)500ml瓶
Chlorogenic acid 綠原酸1g瓶
N-acetyl-beta-d-glucosamine N-乙酰-D-氨基葡萄糖25g瓶
Isobavachin 異補(bǔ)骨脂二氫黃酮31524-62-620mg
羧芐青溶液(50mg/ml)10ml瓶
SDS-PAGE凝膠制備試劑盒25T盒
Manganese chloride 無(wú)水化錳100g瓶
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