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蛋白二硫化物異構酶A4(PDIA4)重組蛋白人

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2023-03-13 15:07:30瀏覽次數(shù):137次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號 GOY-01D1550 應用領域 化工
主要用途 僅供科研實驗 英文名稱 Recombinant Protein Disulfide Isomerase A4 (PDIA4)
物種 Homo sapiens (Human,人)
蛋白二硫化物異構酶A4(PDIA4)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:磷酸化非受體激酶c-Abl抗體 英文名稱:phospho-c-Abl (Tyr185) 0.1ml酪蛋白激酶1γ2抗體 英文名稱:CSNK1G2 0.2ml抑制因子FBW7抗體 英文名稱:CDC4 0.2ml

以下是相關產(chǎn)品:

顆粒酶M(GZMM)重組蛋白英文名稱:Recombinant Granzyme M (GZMM)GZM-M; LMET1; MET1; Hu-Met-1; Met-ase; Lymphocyte Met Ase 1; Met-1 serine protease; Natural killer cell granular protease物種:Rat,大鼠

脂蛋白脂酶(LPL)重組蛋白英文名稱:Recombinant Lipoprotein lipase (LPL)LIPD; Lipase, Lipoprotein物種:Mouse,小鼠

二氫乳清酸脫氫酶(DHODH)重組蛋白英文名稱:Recombinant Dihydroorotate Dehydrogenase (DHODH)DHOdehase; Dihydroorotate oxidase; Dihydroorotate dehydrogenase (quinone), mitochondrial物種:Human,人

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號

蛋白二硫化物異構酶A4(PDIA4)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D1550

 

 

英文名稱:Recombinant Protein Disulfide Isomerase A4 (PDIA4)

PDI-A4; ERP70; ERP72; Protein Disulfide Isomerase-Associated 4; Endoplasmic reticulum resident protein 70

型號:GOY-01D1550

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位::內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔

預測分子量:17.3KDa

實際分子量:17kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽:Phe505~Thr636 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點:9.4

應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

周期素H抗體 Cyclin H 0.2ml

凋亡相關蛋白激酶1抗體 DAPK1 0.1ml

磷酸化上皮細胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體 phospho-ECT2 (Thr790) 0.1ml

蛋白激酶受體B2抗體 EphB2 R 0.1ml

脂肪酸去飽和酶1抗體 FADS1 0.2ml

肌球蛋白XVIIIb抗體 Myosin-XVIIIb 0.2ml

β-肌動蛋白抗體(內(nèi)參抗體) beta-Actin (Loading Control) 0.1ml

表皮生長因子抗體 EGF 0.1ml

A型流感病毒-NS1抗體(神經(jīng)酶1) nonstructural protein 1/NS1 0.2ml

?;拾贝济擋C?/span>2抗體 ASAH2 0.2ml

核苷酸交換因子rasgef1a抗體 RASGEF1A 0.2ml

神經(jīng)元,肌肉特異性烯醇化酶抗體 ENO1+ENO2+ENO3 0.2ml

蛋白二硫化物異構酶A4(PDIA4)重組蛋白人17-Methyltestosteron

透析袋夾子40mm個

Naphthalene acetic acid(NAA) α-萘乙酸5g瓶

Polyphyllin VII 重樓皂苷VII76296-75-820mg

結晶紫染色液(0.1%)500ml瓶

Geraniin 老鸛草素60976-49-020mg

PCR反應板96孔塊

HRP標記抗體稀釋液100ml瓶

Konjac glucomannan 魔芋膠100g瓶

細胞核提取試劑盒50T盒

Glycerol 甘油500ml瓶

Fibrinogen 原100mg瓶

 


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