蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Phosphoenolpyruvate Carboxykinase 2, Mitochondrial (PCK2)

PEPCK; PEPCK2

型號：GOY-01D1540

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：線粒體

預(yù)測分子量：21.8kDa

實(shí)際分子量：24kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Leu33~Val198 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：7.9

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

胞漿-5',3'-核苷酸酶(NT5C)重組蛋白英文名稱：Recombinant 5',3'-Nucleotidase, Cytosolic (NT5C)DNT; DNT1; P5N2; PN-I; PN-II; UMPH2; cdN; 5'Nucleotidase,Deoxy(Pyrimidine)Cytosolic Type C; Uridine 5-Prime Monophosphate Hydrolase 2; 5'(3')-deoxyribonucleotidase, cytosolic物種：Human，人

己糖激酶1(HK1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Hexokinase 1 (HK1)HK1-Ta; HK1-Tb; HK1-Tc; HKI; HXK1; Brain form hexokinase物種：Human，人

DNA激活蛋白激酶催化亞基肽(PRKDC)重組蛋白英文名稱：Recombinant Protein Kinase, DNA Activated, Catalytic Polypeptide (PRKDC)HYRC; HYRC1; DNPK1; p350; DNAPK; XRCC7; DNA-PKcs物種：Mouse，小鼠

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

HDHD2B蛋白抗體 HDHD2B/LHPP 0.2ml

殺菌/通透性增加蛋白樣2抗體 BPIL2 0.2ml

胰腺激素抗體 PPY/Pancreatic hormone 0.1ml

貓眼綜合征染色體候選基因6抗體 CECR6 0.2ml

F-box蛋白21抗體 FBXO21 0.2ml

體PSMβ3抗體 Proteasome 20S beta 3 0.2ml

環(huán)指蛋白167抗體 RNF167 0.2ml

肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2B抗體 MEF2B 0.2ml

RNA結(jié)合蛋白26抗體 RBM26 0.2ml

磷酸化T淋巴細(xì)胞連接蛋白抗體 Phospho-BLNK(Tyr491) 0.1ml

1號染色體開放閱讀框103抗體 C1orf103 0.2ml

內(nèi)皮細(xì)胞MMRN1蛋白抗體 MMRN1/ECM 0.2ml

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶2(PCK2)重組蛋白人Combretastatin A-4 康普瑞汀117048-59-620mg

Blue Sepharose CL-6B 藍(lán)色-糖凝膠 CL-6B25mL瓶

Sweroside 獐牙菜苷-當(dāng)藥苷14215-86-220mg

Chitin 幾丁質(zhì)10g瓶

Isorhamnetin 異鼠李素480-19-320mg

Rifampicin 250mg支

羊抗大鼠IgG（免疫血清）0.5ML支

96孔酶標(biāo)板(可拆)25塊/包塊

Leupeptin 亮抑酶肽2mg瓶

Sulfamethoxazole 磺胺甲惡唑5g瓶

Lyticase 溶壁酶5ku瓶

Angelica Polysaccharide 當(dāng)歸多糖20mg

soy bean flour 大豆粉（發(fā)酵專用）500g瓶