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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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轉(zhuǎn)酮醇酶(TKT)重組蛋白人

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產(chǎn)品型號(hào)

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-10 09:55:34瀏覽次數(shù):334次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D893 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Transketolase (TKT)
物種 Homo sapiens (Human,人)
轉(zhuǎn)酮醇酶(TKT)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:磷酸化ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體 英文名稱:phospho-arfaptin 2 (Ser260) 0.1ml磷酸化有絲分裂激酶B/C抗體 英文名稱:Phospho-Aurora B (Thr232) + Aurora C (Thr198) 0.1ml磷酸化能受體β2抗體 英文名稱:phospho-ADRB2 (Ser346) 0.1ml

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

產(chǎn)品名稱:二酰甘油激酶α(DGKa)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)  英文名稱:Recombinant Diacylglycerol Kinase Alpha (DGKa)

產(chǎn)品名稱:泛素羧基端酯酶L1(UCHL1)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L1 (UCHL1)

產(chǎn)品名稱:脫氧核糖核酸酶Ⅰ樣2(DNASE1L2)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)  英文名稱:Recombinant Deoxyribonuclease I Like Protein 2 (DNASE1L2)

產(chǎn)品名稱:巖藻糖苷酶αL1(FUCa1)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)  英文名稱:Recombinant Fucosidase Alpha L1, Tissue (FUCa1)

產(chǎn)品名稱:胰凝乳C(CTRC)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)  英文名稱:Recombinant Chymotrypsin C (CTRC)

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

轉(zhuǎn)酮醇酶(TKT)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D893

 

 

英文名稱:Recombinant Transketolase (TKT)

TK; Wernicke-Korsakoff Syndrome

型號(hào):GOY-01D893

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì), 細(xì)胞外基質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量:36.0kDa

實(shí)際分子量:36kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽:Met1~Pro294 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):6.8

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

受體3A抗體 NMDAR3A

軸突蛋白1β/Neurexin 1β抗體 Neurexin 1 beta

受體3B抗體 NR3B

受體3A+3B抗體 NMDAR3A + 3B

P53誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡抑制蛋白α抗體 NME6

胞質(zhì)5'核苷酸酶1A抗體 NT5C1A

NOC2家族樣蛋白抗體 NOC2L

硝基抗體 Nitrotyrosine

神經(jīng)內(nèi)分泌特異性蛋白2抗體 NSPL2

還原型輔酶Ⅱ氧化酶5/腺嘌呤二核苷酸磷酸抗體 NOX5

核蛋白p8抗體 NUPR1

核干細(xì)胞因子抗體(核苷酸結(jié)合蛋白3) Nucleostemin

轉(zhuǎn)酮醇酶(TKT)重組蛋白人DeoxyribonueleaseⅠ DNase I(牛胰) (進(jìn)口)15ku瓶

PEG 4000 聚乙二醇 4000250g瓶

ONPG 鄰硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷1g瓶

DMSO 二甲亞砜100ml瓶

50ml離心管(尖底羅口)50支包

X/gal(20mg/ml)1ml瓶

IgG干粉1g支

SDS-PAGE凝膠制備試劑盒50T盒

高效RIPA組織-細(xì)胞快速裂解液100ml瓶

Scopolin 東莨菪苷531-44-220mg

Cytidine 5'-triphosphate disodium salt 5-胞苷三磷酸二鈉鹽500mg瓶

植物基因組100T盒

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