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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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泛素結(jié)合酶E2C(UBE2C)重組蛋白人

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-08 16:19:54瀏覽次數(shù):262次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D777 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Ubiquitin Conjugating Enzyme E2C (UBE2
物種 Homo sapiens (Human,人)
泛素結(jié)合酶E2C(UBE2C)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:載脂蛋白B受體抗體 英文名稱:APOB48R 0.2ml三結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 英文名稱:ABCA2 0.2ml花生四烯酸15脂氧合酶2抗體 英文名稱:ALOX15B 0.2ml

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

泛素結(jié)合酶E2C(UBE2C)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D777

 

 

產(chǎn)品名稱:泛素結(jié)合酶E2C(UBE2C)重組蛋白人

英文名稱:Recombinant Ubiquitin Conjugating Enzyme E2C (UBE2C)

UBCH10; Ubiquitin carrier protein C; Ubiquitin-protein ligase C

型號(hào):GOY-01D777

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::分泌

預(yù)測(cè)分子量:23.2kDa

實(shí)際分子量:25kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Ala2~Pro179 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點(diǎn):7.1

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:

產(chǎn)品名稱:過氧化還原酶5(PRDX5)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Peroxiredoxin 5 (PRDX5)

產(chǎn)品名稱:過氧化還原酶6(PRDX6)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Peroxiredoxin 6 (PRDX6)

產(chǎn)品名稱:過氧化還原酶2(PRDX2)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Peroxiredoxin 2 (PRDX2)

產(chǎn)品名稱:跨膜4(TMPRSS4)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Transmembrane Protease, Serine 4 (TMPRSS4)

產(chǎn)品名稱:核苷酸還原酶M1(RRM1)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Ribonucleotide Reductase M1 (RRM1)

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

基膜聚糖蛋白抗體 Lumican

賴氨酰氧化酶相關(guān)蛋白2抗體 LOXL2

李斯特菌溶胞素抗體 Listeriolysin

羧基甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 LCMT1

宮頸癌原癌基因2抗體 LETMD1

賴氨酰氧化酶樣蛋白4抗體 LOXL4

乳鐵蛋白抗體 Lactoferrin

層粘連蛋白1+2抗體 Laminin 1+2

受體蛋白磷酸酶F抗體 LAR

磷酸化5-脂氧合酶抗體 Phospho-5-Lipoxygenase(Ser524)

富含重復(fù)蛋白15抗體 LRRC15

低分子質(zhì)量蛋白2抗體 LMP2

泛素結(jié)合酶E2C(UBE2C)重組蛋白人Linoleic acid 60-33-30.2ml

通用反轉(zhuǎn)錄試劑盒(M-MLV,不含Taq酶)100T瓶

vitamin D2 250-14-620mg

羊抗小鼠IgG-RBITC0.5ml支

Indole-3-butyricacid(IBA) 吲哚-4-丁酸(水溶)5g瓶

Hematoxylin 蘇木素517-28-220mg

Capril 5g瓶

1.5ml離心管,10盒/箱500支盒

4-MUG 4-甲傘形酮-beta-D-葡糖苷酸250mg瓶

(載玻片盒)切片盒100片盒

1-丁基-3-甲咪唑四氟硼酸鹽5g瓶

Tylosin 泰樂菌素5g瓶

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