蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Glycogen Synthase Kinase 3 Beta (GSK3b)

Serine/threonine-protein kinase GSK3B

型號(hào)：GOY-01D718

酶與激酶

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞膜, 細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：32.6kDa

實(shí)際分子量：33kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Lys122~Thr375 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：7.8

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：過(guò)氧化氫酶(CAT)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Catalase (CAT)

產(chǎn)品名稱：過(guò)氧化氫酶(CAT)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant Catalase (CAT)

產(chǎn)品名稱：脫氧胞苷激酶(DCK)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Deoxycytidine Kinase (DCK)

產(chǎn)品名稱：脂肪酸去飽和酶1(FADS1)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Fatty Acid Desaturase 1 (FADS1)

產(chǎn)品名稱：脂肪酸去飽和酶1(FADS1)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant Fatty Acid Desaturase 1 (FADS1)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

磷酸化原癌基因c-Jun抗體 phospho-c-Jun(Tyr170)

組蛋白去甲基轉(zhuǎn)移酶JMJD7抗體 JMJD7

磷酸化活化蛋白激酶D抗體 phospho-JunD(Ser255)

磷酸化活化蛋白激酶B抗體 phospho-JunB (Ser79)

磷酸化活化蛋白激酶B抗體 phospho-JunB(Ser259)

磷酸化組蛋白去甲基化酶JMJD2B抗體 phospho-JMJD2B(Thr305)

絲裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白2抗體 JIP2

絲裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白3抗體 JIP3

磷酸化蛋白質(zhì)激酶JAK-1抗體 Phospho-Jak1 (Tyr1022 + Tyr1023)

氨基末端激酶2抗體 JNK2

磷酸化氨基末端激酶1/2/3抗體 phospho-JNK1 + 2 + 3 (Thr183+Tyr185)

連接介導(dǎo)調(diào)節(jié)蛋白抗體 JMY

糖原合酶激酶3β(GSK3b)重組蛋白大鼠無(wú)菌綿羊血清/Sterile Defidrinated Sheep BloodBR100毫升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

層粘連蛋白α1(LAMα1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Laminin Alpha 1 (LAMa1)

制檢定培養(yǎng)基/Nystatin Medium250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

Tolloid樣蛋白1(TLL1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Tolloid Like Protein 1 (TLL1)

hFOB 1.19(SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

IgG-Fc片段低親和力受體Ⅲa(FcγR3A)重組蛋白英文名稱：Recombinant Fc Fragment Of IgG Low Affinity IIIa Receptor (FcgR3A)

SK-N-SH(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

成人真皮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

HO-8910(人卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

亞鉍指示劑/BSI/Bismuth Sulfite Indicator專做亞鉍培養(yǎng)基指示劑用60克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

肽酶D(PEPD)重組蛋白英文名稱：Recombinant Peptidase D (PEPD)