抗人肝癌單抗HAb18雜交瘤細(xì)胞；HAb18說(shuō)明書(shū)【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱(chēng) 抗人肝癌單抗HAb18雜交瘤細(xì)胞；HAb18說(shuō)明書(shū)
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性  產(chǎn)生單克隆抗體為IgG1型；FCM(+),WB(+),ELISA(+),ICH(+)。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C25
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR  -
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類(lèi)

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以?xún)?nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

大鼠淋巴細(xì)胞趨化試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T大鼠淋巴細(xì)胞趨化試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠淋巴細(xì)胞趨化試劑盒、大鼠淋巴細(xì)胞趨化eisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
大鼠活化A試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T大鼠活化A試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠活化A試劑盒、大鼠活化Aeisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
大鼠抗雙鏈DNA抗體試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T大鼠抗雙鏈DNA抗體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠抗雙鏈DNA抗體試劑盒、大鼠抗雙鏈DNA抗體eisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
大鼠凋亡相關(guān)配體試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T大鼠凋亡相關(guān)配體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠凋亡相關(guān)配體試劑盒、大鼠凋亡相關(guān)配體eisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
大鼠大內(nèi)皮試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T大鼠大內(nèi)皮試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠大內(nèi)皮試劑盒、大鼠大內(nèi)皮eisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
大鼠層連試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T大鼠層連試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠層連試劑盒、大鼠層連eisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
大鼠c-jun試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T大鼠c-jun試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠c-jun試劑盒、大鼠c-juneisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
大鼠β細(xì)胞試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T大鼠β細(xì)胞試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠β細(xì)胞試劑盒、大鼠β細(xì)胞eisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
大鼠主要堿性試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T大鼠主要堿性試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠主要堿性試劑盒、大鼠主要堿性eisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
100g        麥芽浸膏
5g        吖啶橙
50 次        菌落 PCR 試劑盒 2.0
1mL        GS115 酵母菌種
9° N DNA 連接酶    2500U    130624-2500
即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒    50 次    101219-50
0.1mL        微量 DNA 助沉劑
500mL        HAT 篩選培養(yǎng)基
5g        維生素 B6
250 mL        PLPD 固定液
脲酶 ( 尿素酶 巨豆 )    20Ku    CAS9002-13-5
McCoy's5A 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 )    500mL    19-0140-500
96 孔板血液 DNAout( 真空法 )    5次    80920-5
100mL        曲拉通 X-100
100mg        Dansyl chloride 
10 次        大提柱式質(zhì)粒 DNAout 
60U        Poly(U) 聚合酶
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚基磷 (BCIP)    100mg    CAS102185-49-9
WB600 枯草宿主菌菌種    1mL    12-210
50 次        一管式病毒 DNAout
250mL        考馬斯亮藍(lán) G-250 染液