雜交瘤細胞株；LZLPHZ圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱 雜交瘤細胞株；LZLPHZ圖片
形態(tài)特性  淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 未定

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

LZTS1  假定瘤抑制亮氨酸拉鏈蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
Dysferlin  Dysferlin蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
ARSA  芳香基硫酸酯酶1抗體規(guī)格: 0.2ml
VCP  含纈酪肽蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
phospho-DDX58 (Ser8)  磷酸化DDX58抗體規(guī)格: 0.1ml
SCEL  SCEL蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
TSARG4  生細胞凋亡相關基因4抗體規(guī)格: 0.1ml
Cystatin A  胱抑素A/半胱氨酸蛋白酶抑制劑A抗體規(guī)格: 0.2ml
CKS2  細胞周期蛋白依賴性激酶調節(jié)亞基2抗體規(guī)格: 0.2ml
Rarres3/TIG3  視黃酸受體應答蛋白3抗體規(guī)格: 0.1ml
CRF/CRH  促腎上腺皮質激素釋放因子抗體規(guī)格: 0.1ml
VRK1  牛痘病毒相關激酶1抗體（絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶VRK1）規(guī)格: 0.2ml
MAP3K7IP1/TAB1  轉化生因子β活化激酶結合蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml
CNGA2  環(huán)核苷酸陽離子通道蛋白α2抗體規(guī)格: 0.1ml
JMY  連接介導調節(jié)蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Phospho-SRF (Ser103)  磷酸化生激素釋放因子抗體(血清應答因子)規(guī)格: 0.1ml
ChRM2/Acetylcholine receptor(M2)  毒蕈堿型乙酰膽堿受體抗體規(guī)格: 0.1ml
Creatine Kinase MM  肌酸激酶M型抗體規(guī)格: 0.2ml
SLC25A10  線粒體二羧酸載體蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
CNTROB  腺易感基因2相互作用蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml10mL        胰蛋白酶抑制劑，10mg/mL
角膜上皮細胞生長因子    5mL    21-0160-5 
RNase-free 75% 乙醇    250mL    60401-250
10mL        PCR Mix 染料
2mL        氨基磁珠
4次        大提柱式土壤 DNAout
200U        Afu 尿嘧啶 -DNA 糖基化酶
二甲基酸    5g    CAS6131-99-3
DNA 快速連接試劑盒    100 次    70602-100
20 次        一站式 MBP 標簽蛋白純化套裝
7次        克必隆 eTS 細菌基因組差減雜交試劑盒
10g        卵清蛋白 
5mL        成纖維細胞生長因子
100g        DNA  EDTA 2Na
雙染細胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V- 熒光素 488·PI）     20 次    140628-20
Southern DNA Marker( 生物素 )    20 次    120654A-20 
30 次        石蠟包埋組織 DNAout
100mL        動物 RNAout(TRIzol) 
100mg        溴化乙錠 (EB)
100mL        DNA  Tween 20
L- 賴氨酸    25g    CAS56-87-1
EGTA 溶液 ,0.5mg/mL, 蛋白    10mL    130532-10