雜交瘤細(xì)胞株；F6-F2圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞株；F6-F2圖片
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

phospho-ATF2 (Thr55)  磷酸化活化復(fù)制因子2抗體規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-rabbit IgG/AP  堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的小鼠抗兔IgG規(guī)格: 0.1ml
FGF6  纖維母細(xì)胞生因子6抗體規(guī)格: 0.1ml
CCDC18  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白18抗體規(guī)格: 0.2ml
Dog IgM/AP  堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體規(guī)格: 0.1ml
EDNRA  內(nèi)皮素受體A抗體規(guī)格: 0.1ml
phospho-FER/TYK3(Tyr402)  磷酸化酪氨酸蛋白激酶3抗體規(guī)格: 0.1ml
TXNIP  硫氧還蛋白結(jié)合蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml
Cubilin  內(nèi)皮因子維生素B12受體抗體規(guī)格: 0.2ml
ATAD5  染色體脆弱性相關(guān)基因抗體規(guī)格: 0.2ml
STAT4  信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體規(guī)格: 0.1ml
phospho-p95 NBS1(Ser343)  磷酸化滑膜細(xì)胞凋亡抑制物1抗體規(guī)格: 0.1ml
MyoD1/Myf3  肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
DRAM  DNA損傷自噬調(diào)整蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
SMARCA6/HELLS  淋巴特異性解旋酶抗體規(guī)格: 0.2ml
MMP-8  基質(zhì)金屬蛋白酶-8抗體規(guī)格: 0.1ml
CPN2  羧肽酶CPN2抗體規(guī)格: 0.2ml
SORBS2/ArgBP2  氨酸結(jié)合蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml
MCP1/CCL2  單核細(xì)胞趨化蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml50 次        一站式柱式 miRNAout
1mL        Y1089 菌種
φ29 DNA 聚合酶    250U    100937-250
柱式 miRNA PAGE 膠回收試劑盒    50 次    80203-50
2mL        羧基磁珠
1mL        單細(xì)胞懸浮液
1mL        Tricine-SDS-PAGE 上樣液
20μL        COX IV 兔單抗
RecJf 核酸外切酶    1000U    130629-1000
綠如藍(lán)染料，PCR     0.1mL    70909-0.1
20 次        天凈沙鎳柱原位再生試劑盒
10×100μL        EHA105 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞
50 次        柱式骨骼 DNAout
1000U        Taq 酶抗體
氯化乙酰膽堿    1g    CAS60-31-1
鳥類種屬鑒定 PCR Mix    100 次    131128K-100
0.1 mL×10        XL10-Gold 感受態(tài)細(xì)胞
48 T        肝 / 肌糖元測(cè)試盒 
5g        8- 羥基喹啉
10 次        百萬(wàn)堿基真菌 DNAout