人肺腺癌細(xì)胞；SPC-A-1價格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

人肺腺癌細(xì)胞；SPC-A-1價格操作步驟：

1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱

形態(tài)特性  上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  SPC-A1是一株常用的肺癌細(xì)胞系，也被用于肺癌發(fā)病機(jī)理和抗腫瘤藥物的體外研究試驗(yàn)研究。具有典型的上皮細(xì)胞狀形態(tài)結(jié)構(gòu)。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C125
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR  STR鑒定
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

81107-*提無內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout10 次
人淋巴細(xì)胞分離液 1.077(FICOLL 配置 ) 200mL
D- 甘露醇250g
柱式無內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout50 次
雜交管 (35×100mm)1個
18-0510-24乳酸脫氫酶測試盒24 T
100874-1.5DNA 尿素 -PAGE 上樣液1.5mL
山羊抗小鼠 IgG(H+L)，異硫氰酸熒光素標(biāo)記1000 μL
DNA  Tris HCl，1M，pH7.5100mL
動物細(xì)胞裂解液 A50mL
克必隆 eTS 超敏 PCR 法 cDNA 合成試劑盒10 次
130620-60Poly(U) 聚合酶60U
90604B-5PCR 法 DNA 探針生物素標(biāo)記試劑盒 5次
T7 RNA 聚合酶25000U
刀豆球蛋白 A Ⅲ50mg
RNase A 干粉500mg
小鼠抗 CBP 標(biāo)簽單抗100μL
130868-1二硫鍵異構(gòu)酶，人1mg
130815-250Taq 酶抗體250U
土鹽溶液 ,100mg/mL10mL
F12K 液體培養(yǎng)基 ( 無血清和雙抗 )500mL
N,N- 雙 (2- 羥乙基 )-3- 氨基乙磺酸5g81107-*提無內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout10 次
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D- 甘露醇250g
柱式無內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout50 次
雜交管 (35×100mm)1個
18-0510-24乳酸脫氫酶測試盒24 T
100874-1.5DNA 尿素 -PAGE 上樣液1.5mL
山羊抗小鼠 IgG(H+L)，異硫氰酸熒光素標(biāo)記1000 μL
DNA  Tris HCl，1M，pH7.5100mL
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克必隆 eTS 超敏 PCR 法 cDNA 合成試劑盒10 次
130620-60Poly(U) 聚合酶60U
90604B-5PCR 法 DNA 探針生物素標(biāo)記試劑盒 5次
T7 RNA 聚合酶25000U
刀豆球蛋白 A Ⅲ50mg
RNase A 干粉500mg
小鼠抗 CBP 標(biāo)簽單抗100μL
130868-1二硫鍵異構(gòu)酶，人1mg
130815-250Taq 酶抗體250U
土鹽溶液 ,100mg/mL10mL
F12K 液體培養(yǎng)基 ( 無血清和雙抗 )500mL
N,N- 雙 (2- 羥乙基 )-3- 氨基乙磺酸5g