人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株；PG-LH7價(jià)格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株；PG-LH7價(jià)格操作步驟：

1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  母系人肺巨細(xì)胞癌PG，單細(xì)胞克隆法分離鑒定得到的低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株；裸鼠體內(nèi)成瘤率100%，肺轉(zhuǎn)移率44%，淋巴轉(zhuǎn)移率50%。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代；2~3天1次。
傳代情況 P6
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：X；CSF1PO：12，13；D13S317：12；D16S539：13；D18S51：14；D19S433：13，15.2；D21S11：29；D2S1338：18；D3S1358：16，17；D5S818：11；D7S820：9；D8S1179：13，15；FGA：19；TH01：7；TPOX：11，12；vWA：18；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

雪旺細(xì)胞生長因子5mL
IPTG 干粉2.5g
21-0450-5周細(xì)胞生長因子5mL
17-004-100010 μL RNase-free 白吸頭 ( 袋裝 )1000 支
Protein A 瓊脂糖1mL
BL21-CodonPlus-RP 菌種1mL
NS-398(COX-2 抑制劑 )1mg
動(dòng)物線粒體純化試劑盒 ( 粗提 )15 次
23-0570-100Paclitaxel(TAXOL)( 紫杉醇 )100μL
70901-50柱式真菌 DNAout50 次
RNase A 溶液，10mg/mL1.5mL
超雜交液 ( 芯片 )10mL
硫酸卡那霉素溶液 ,50mg/mL10mL
噻孢霉素溶液 ,100mg/mL1mL
131012-1螢火蟲熒光素1mL
80934D-10TE 緩沖液，PH8.510mL
Southern 細(xì)菌 (G+)DNAout10 次
dITP 溶液，2.5mM2mL
即用型 PCR 試劑盒 2.0 9 mL
C600 菌種1mL
130405-10克必隆 eTS 超敏 PCR 法 cDNA 合成試劑盒10 次
90212-50高載量 PCR 片段純化試劑盒50 次Difenoconazole環(huán)唑119446-68-3
Alantolactone土木香內(nèi)酯546-43-0
Disodium fumarate富馬酸17013-01-3
Clorpyrifos毒死蜱2921-88-2
Zinc acetate醋酸鋅557-34-6
DIOSMETIN香葉木素520-34-3
3,3',4',5,7-Pentahydroxyflavone槲皮素117-39-5
TRIS(4,6-DIMETHYL-3-SULFANATOPHENYL)PHOSPHINE TRISODIUM SALT HYDRATE三(2,4-二基基)磷化氫-5,5',5''-三磺酸三443150-11-6
D-(+)-SORBOSED-山梨糖3615-56-3
PERFLUORO-2-METHYLPENTANE2-三基-1,1,1,2,3,3,4,4,5,5,5-十一代烷355-04-4
n-Propyl ether丙111-43-3
P-TOLUALDEHYDE 2,4-DINITROPHENYLHYDRAZONE對(duì)-DNPH2571-00-8
VARIAMINE BLUE B凡拉明藍(lán)B3566-44-7
Hydroxypropyl acrylate丙酸羥丙酯25584-83-2
SODIUM HYDROGEN FUMARATE富馬酸氫5873-57-4
Organic carbon(TOC) in water總有機(jī)碳（TOC）標(biāo)準(zhǔn)溶液
Potassium hydride氫化鉀7693-26-7
Dicyclohexylchlorophosphine二環(huán)己基化膦16523-54-9
Chloromethyl ethyl ether基3188-13-4
LAURIC ACID SODIUM SALT月桂酸629-25-4
ophiopogonin B麥冬皂苷 B38971-41-4