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骨髓瘤細胞懸液的制備方法分析

時間:2017/3/16閱讀:918
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zui常用的干細胞系為SP2/0和NS-1,均來自BALB/c小鼠骨髓瘤。一般在準備融合前的兩周就應開始復蘇骨髓瘤細胞,為確保該細胞對HAT的敏感性,每3~6個月應用8-氮雜鳥嘌呤篩選一次,以防止細胞的突變。骨髓瘤細胞懸液的制備方法如下:
1.將剛復蘇的瘤細胞培養(yǎng)于含10%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)液中,5% C02,37℃溫箱孵育。每2~3天換液一次,3~5天傳代一次,待細胞生長穩(wěn)定后方可供細胞融合用。于融合前48~36小時,將骨髓細胞擴大培養(yǎng)(一般按一塊96孔板的融合試驗需2~3瓶100m1培養(yǎng)瓶培養(yǎng)的細胞進行準備)。
2.融合當天,用彎頭滴管將細胞從瓶壁上輕輕吹下,收集于50m1離心管或融合管內(nèi)。
3. 1000r/min離心5~10分鐘,棄去上清液。
4.加入30m1不*培養(yǎng)基,同法離心洗滌一次。然后將細胞重懸浮于lOml不*培養(yǎng)基,混勻。
5.取骨髓瘤細胞懸液在倒置顯微鏡下觀察,生長良好的細胞明亮呈圓形,排列整齊,形態(tài)完整,密度適宜(0.1x106~1x106/ml)。經(jīng)錐蟲藍染色,活干細胞數(shù)應大于90%。

人星形膠質(zhì)細胞微小RNA    英文名稱:    HA miRNA    規(guī)格:    1 µg
人小腦星形膠質(zhì)細胞微小RNA    英文名稱:    HA-c miRNA    規(guī)格:    1 µg
人脊髓星形膠質(zhì)細胞微小RNA    英文名稱:    HA-sp miRNA    規(guī)格:    1 µg
人海馬趾星形膠質(zhì)細胞微小RNA    英文名稱:    HA-h miRNA    規(guī)格:    1 µg
人小膠質(zhì)細胞微小RNA    英文名稱:    HM miRNA    規(guī)格:    1 µg
人微血管內(nèi)皮細胞微小RNA    英文名稱:    HDMEC miRNA    規(guī)格:    1 µg
人淋巴管內(nèi)皮細胞微小RNA    英文名稱:    HDLEC miRNA    規(guī)格:    1 µg
人表皮角質(zhì)細胞微小RNA    英文名稱:    HEK miRNA    規(guī)格:    1 µg
人表皮角質(zhì)細胞-成人微小RNA    英文名稱:    HEK-a miRNA    規(guī)格:    1 µg
人表皮黑色素細胞-淺色素微小RNA    英文名稱:    HEM-l miRNA    規(guī)格:    1 µg
人表皮黑色素細胞-中色素微小RNA    英文名稱:    HEM-m miRNA    規(guī)格:    1 µg
人表皮黑色素細胞-深色素微小RNA    英文名稱:    HEM-d miRNA    規(guī)格:    1 µg
人成纖維細胞-胎兒微小RNA    英文名稱:    HEF-f miRNA    規(guī)格:    1 µg
人成纖維細胞-新生兒微小RNA    英文名稱:    HEF-n miRNA    規(guī)格:    1 µg
人成纖維細胞-成人微小RNA    英文名稱:    HEF-a miRNA    規(guī)格:    1 µg
人毛乳頭細胞微小RNA    英文名稱:    HHDPC miRNA    規(guī)格:    1 µg
人生發(fā)基質(zhì)細胞微小RNA    英文名稱:    HHGMC miRNA    規(guī)格:    1 µg
人毛囊外根殼細胞微小RNA    英文名稱:    HHORSC miRNA    干細胞規(guī)格:    1 µg

 

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