 | 紅榮微再（上海）生物工程技術(shù)有限公司 |
11
15021010459
當前位置：首頁>>技術(shù)中心>>技術(shù)文章>>貼壁細胞轉(zhuǎn)染優(yōu)選：ProteanFect轉(zhuǎn)染試劑盒
在線溝通：
顏先生 （銷售）
- 電話：
- 400-021-2200
- 手機：
- 15021010459
- 傳真：
- 聯(lián)系我時，
- 告知來自化工儀器網(wǎng)
- 個性化：
- www.hyrmb.com.cn
- 商鋪網(wǎng)址：
- http://www.hbwxwy.cn/st321032/
- 公司網(wǎng)站：
- www.hyrmb.com
貼壁細胞轉(zhuǎn)染優(yōu)選：ProteanFect轉(zhuǎn)染試劑盒
閱讀：383發(fā)布時間：2025-2-13
01. 貼壁VS懸浮轉(zhuǎn)染區(qū)別
貼壁轉(zhuǎn)染與懸浮轉(zhuǎn)染在操作流程、時間成本、轉(zhuǎn)染效率、操作難度、細胞用量、觀察難度和適用場景上有所區(qū)別。貼壁轉(zhuǎn)染通常需要較長時間等待細胞貼壁，但操作簡單，轉(zhuǎn)染效率高，適合常規(guī)轉(zhuǎn)染實驗和需要高效率轉(zhuǎn)染的場景。懸浮轉(zhuǎn)染則時間成本較短，細胞用量更靈活，適合快速篩選實驗和大規(guī)模轉(zhuǎn)染。
02. 細胞培養(yǎng)與準備
以LX2細胞為例，這是一種人類肝星狀細胞的永生化細胞系，廣泛用于肝臟研究。LX2細胞貼壁生長，呈上皮細胞樣。培養(yǎng)基成分為DMEM培養(yǎng)基，含10%胎牛血清和1%雙抗。轉(zhuǎn)染前，確保細胞處于良好生長狀態(tài)，活率需超過90%。調(diào)整細胞轉(zhuǎn)染密度時，避免反復(fù)離心，以免影響細胞活力和轉(zhuǎn)染效率。
03. 轉(zhuǎn)染操作
3.1 細胞準備
- 提前一天種板，準備貼壁細胞。
- 在96孔板中加入約2.5×10^4細胞，細胞過夜貼壁。
- 待細胞匯合度為70%-80%時，棄去培養(yǎng)基后，用Opti-MEM輕柔清洗細胞兩次，并加入20 μL Opti-MEM備用。
3.2 配置ProteanFect轉(zhuǎn)染體系
- 在40 μL Reagent A中加入0.5 μg EGFP mRNA，充分混勻。
- 往上述混合物中加入1.4 μL Reagent B混勻。
3.3 轉(zhuǎn)染
- 將上述ProteanFect轉(zhuǎn)染液加入細胞。
- 37℃培養(yǎng)箱孵育60分鐘。
04. 轉(zhuǎn)染檢測
使用ProteanFect試劑盒轉(zhuǎn)染LX2細胞后，可以通過熒光顯微鏡觀察EGFP的表達，評估轉(zhuǎn)染效率和細胞形態(tài)。細胞活率可通過鏡下觀察、臺盼藍染色或流式細胞術(shù)等方法檢測。
紅榮微再（上海）生物工程技術(shù)有限公司主營產(chǎn)品：BD全血RNA采血管-分子診斷供應(yīng)商
化工儀器網(wǎng) 設(shè)計制作，未經(jīng)允許翻錄必究.Copyright(C) http://www.hbwxwy.cn, All rights reserved.
以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責(zé)，化工儀器網(wǎng)對此不承擔任何保證責(zé)任。 溫馨提示：為規(guī)避購買風(fēng)險，建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。
