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內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基的詳細(xì)配方
閱讀：1065發(fā)布時(shí)間：2024-10-11
內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基的配方通常包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基和特定的補(bǔ)充成分。以下是一個(gè)常用的內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基配方示例：
基礎(chǔ)培養(yǎng)基
Dulbecco'sModifiedEagleMedium(DMEM)或RPMI1640
選擇合適的基礎(chǔ)培養(yǎng)基，DMEM比較常用。
補(bǔ)充成分
胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)
最終濃度：10%（v/v）
青霉素-鏈霉素溶液(Penicillin-Streptomycin)
最終濃度：100U/mL青霉素和100μg/mL鏈霉素。
內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EndothelialGrowthFactor,EGF)
最終濃度：10-20ng/mL。
血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VascularEndothelialGrowthFactor,VEGF)
最終濃度：10-50ng/mL。
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TransformingGrowthFactor-beta,TGF-β)
最終濃度：1-10ng/mL（可選）。
其他添加劑（可根據(jù)需要選擇）：
生長(zhǎng)因子（如FGF，基本成纖維生長(zhǎng)因子）、胰島素、氨基酸等。
配制步驟
準(zhǔn)備基礎(chǔ)培養(yǎng)基：根據(jù)需要取適量的DMEM或RPMI1640。
添加胎牛血清：加入FBS，輕輕混合均勻。
添加抗生素：加入青霉素-鏈霉素溶液，混合均勻。
添加生長(zhǎng)因子：按照上述濃度分別添加EGF、VEGF、TGF-β等生長(zhǎng)因子。
調(diào)節(jié)pH：確保培養(yǎng)基的pH在7.2-7.4之間，可以使用鹽酸或氫氧化鈉進(jìn)行調(diào)節(jié)。
過濾滅菌：使用0.22μm過濾器進(jìn)行滅菌，以去除微生物。
存儲(chǔ)條件
配制好的培養(yǎng)基應(yīng)存放在4°C冰箱中，避免反復(fù)凍融，建議使用時(shí)分裝。
請(qǐng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要調(diào)整成分及其濃度，并遵循相關(guān)的操作規(guī)程和安全指南。
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