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江西PCR實驗室裝修工程建立前PCR區(qū)
PCR實驗室可以是分散形式也可以是組合形式。完成一組PCR實驗通常應(yīng)經(jīng)過試劑配制、樣品處理、核酸擴增及產(chǎn)物分析四個實驗過程若實驗工藝需要還應(yīng)增加樣品粉碎過程。
一、分散形式PCR實驗室
所謂分散形式PCR實驗室是指完成上述實驗過程的實驗用房彼此相距較遠呈分散布置形式。對于這種布置形式的PCR實驗室由于各個實驗之間不易
相互干擾因此無需特殊條件要求。
二、組合形式PCR實驗室
所謂組合形式PCR實驗室, 是指完成PCR四個實驗過程的實驗用房相鄰布置組成獨立實驗區(qū)域的形式。對于組合形式PCR實驗室由于各個實驗間集中布置容易造成相互干擾因此對總體布局以及屏障系統(tǒng)具有一定的要求。各室在入口處設(shè)緩沖間以減少室內(nèi)外空氣交換。試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓以防外界含核酸氣溶膠的空氣進入造成污染核酸擴增室及產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負壓以防含核酸的氣溶膠擴散出去污染試劑與樣品。如果使用熒光PCR儀擴增室和產(chǎn)物分析室可以合并。
該去專門用于準(zhǔn)備各種反應(yīng),這個區(qū)域必須保持干凈,而且沒有來自克隆和樣品準(zhǔn)備的污染。前PCR區(qū)必須要有試劑和準(zhǔn)備,特別是專門用于前PCR區(qū)的正壓活塞式移液管。
⑴可以把即刻可用的“主混合物”溶液配好、分裝并保存在-20℃或4℃,在實驗室只涉及到擴增一種或少數(shù)幾種特異序列時這樣做很有用。
⑵如果你的實驗室使用多套引物,以致于配制包括所有試劑的單一反應(yīng)混合物不夠經(jīng)濟,可以考慮分裝保存夠一天的PCR成分。
⑶作為一個規(guī)則,應(yīng)該保存一套陰性、弱陽性和強陽性對照樣品來分析樣品配制和PCR前過程的效率和潔凈程度。而且,你也希望通過使用一個已知的弱陽性樣品來驗證你的樣品緩沖液以證明里面不含擴增抑制物。
⑷陰性樣品要與每組樣品同時做,以分析是否存在樣品與樣品之間的污染以及是否存在PCR產(chǎn)物的污染,陰性對照應(yīng)該包括核酸以外的所有試劑。
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