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島津應用:微芯片電泳檢測中華鱉蛋白粉中提取的DNA擴增產(chǎn)物
中華鱉是高蛋白食品,具有滋補身體增強免疫力的功效,然而直接食用中華鱉,其營養(yǎng)吸收率并不高。相比之下,中華鱉蛋白粉更容易被人體吸收,是具有高附加值的營養(yǎng)食品。然而由于中華鱉原料價格昂貴,不法分子容易對其摻假、造假以牟取非法利益。
分子標記(molecular marker)是一種新的遺傳標記方法,它是以 DNA 多態(tài)性與性狀間的緊密連鎖關(guān)系為基礎(chǔ)的遺傳標記。DNA 分子標記是由于缺失、插入、易位、倒位、重排或由于存在長短與排列不一的重復序列等機制而產(chǎn)生的多態(tài)性,其本質(zhì)上是指能反映生物個體或種群間基因組中某種差異特征的DNA 的片段,因此,可以實現(xiàn)物種鑒定的目的。這種 DNA 的片段是基因組 DNA 經(jīng)限制性內(nèi)切酶切割,或作分子雜交后在電泳膠上或檢測得到的。由于基因組一般很大,無法進行全面的序列分析,需要針對基因組中個別特征基因片段進行研究,選擇合適的分子標記片段是一個關(guān)鍵問題。目前的研究對象以線粒體DNA 的細胞色素 b 基因(Cyt b)和核糖體DNA(rDNA)為主。線粒體 Cytb 基因具有 相對高的種間差異、較低的種內(nèi)變異以及相當長的變化序列,因而可通過 Cyt b 鑒別密切相關(guān)的物種。
分子標記技術(shù)為中華鱉蛋白粉鑒定提供了新的檢測手段,這就需要從蛋白粉中提取合適的DNA 用于分子標記。然而中華鱉蛋白粉加工工藝精細,所提得的 DNA 結(jié)構(gòu)是否被破壞,zui終能否用于 PCR 擴增,即 DNA 分子標記鑒定是否適用中華鱉蛋白粉,是一個需要探討的課題。為此本文利用改動的試劑盒方法對市售中華鱉蛋白粉進行 DNA 提取,并用通用線粒體細胞色素 b 基因(Cyt b)引物進行 PCR 擴增,微芯片電泳 MultiNA 檢測擴增產(chǎn)物。結(jié)果表明蛋白粉中可以提取到線粒體細胞色素 b 基因(Cyt b),與從中華鱉肌肉樣品中得到的陽性對照樣品結(jié)果相似,即約 450 bp 的產(chǎn)物。本方法為分子標記技術(shù)應用于高附加值產(chǎn)品的鑒定提供了技術(shù)基礎(chǔ)。
微芯片電泳MultiNA
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關(guān)于島津
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