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導(dǎo)讀

獸藥殘留是影響動(dòng)物性食品安全的主要化學(xué)因素之一，尤其是獸用抗生素殘留會(huì)進(jìn)一步加速細(xì)菌耐藥性進(jìn)程。青霉素類作為最早應(yīng)用的抗生素，歷經(jīng)九十余年，已發(fā)展三代，曾為增進(jìn)人類健康做出過(guò)巨大貢獻(xiàn)。青霉素價(jià)格低廉、抗菌性強(qiáng)，在水產(chǎn)養(yǎng)殖上被廣泛用于魚、蝦細(xì)菌感染的防療。然而，此類抗生素的不合理使用，會(huì)給食品安全帶來(lái)隱患，其產(chǎn)生的耐藥性問(wèn)題或?qū)?dǎo)致人類進(jìn)入無(wú)藥可用的后抗生素時(shí)代或可怕的“耐藥時(shí)代”。近期，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布實(shí)施《GB 31656.12-2021 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 水產(chǎn)品中青霉素類藥物多殘留的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》，青霉素類含有β-內(nèi)酰胺環(huán)，是一類化學(xué)性質(zhì)非?；顫姷奈镔|(zhì)，容易在高溫、水或酸堿條件下發(fā)生降解，一度給分析檢測(cè)帶來(lái)挑戰(zhàn)。針對(duì)該難點(diǎn)項(xiàng)目，我們推出了島津新的應(yīng)用解決方案，來(lái)一起看看！

水產(chǎn)品中青霉素類分析相關(guān)法規(guī)

GB 31650-2019 《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中獸藥最大殘留限量》中規(guī)定，在魚蝦中青霉素G、阿莫西林、氨芐西林殘留限量（MRLs）為50 μg/kg，氯唑西林、苯唑西林MRLs為300 μg/kg。近期，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布的《GB 31656.12-2021 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 水產(chǎn)品中青霉素類藥物多殘留的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》，對(duì)《GB/T 22952-2008 河豚魚和鰻魚中阿莫西林、氨芐西林、哌拉西林、青霉素G、青霉素V、苯唑西林、氯唑西林、萘夫西林、雙氯西林殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了更新，增加了阿洛西林和甲氧西林，并增加了固相萃取和超濾管離心的凈化步驟，修改了方法的檢出限和定量限。

青霉素類分析難點(diǎn)

β-內(nèi)酰胺類抗生素的基本結(jié)構(gòu)如下圖，β-內(nèi)酰胺環(huán)易光解，或與水、醇發(fā)生反應(yīng)。

β-內(nèi)酰胺類抗生素的基本結(jié)構(gòu)（左：青霉素類、右：頭孢菌類）[1]

因此，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需注意：

l 宜采用粉末標(biāo)品，現(xiàn)配現(xiàn)用，前處理避光，配制后盡快分析；

l 考慮到溶解性和溶劑效應(yīng)，標(biāo)準(zhǔn)品母液推薦30%乙腈水配制，-18℃避光存儲(chǔ)，保質(zhì)期5d，工作液則現(xiàn)配現(xiàn)用，盡快上機(jī)分析；

l 有機(jī)相為甲醇時(shí)，青霉素G與甲醇生成了青霉酸甲酯，如下圖所示，青霉素甲酯MRM通道有色譜響應(yīng)，且響應(yīng)強(qiáng)度比青霉素G更高。為了保證定量準(zhǔn)確，流動(dòng)相、前處理試劑應(yīng)該避免接觸醇類試劑。

島津解決方案

l 分析儀器

島津三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀

l 目標(biāo)物

青霉素類抗生素藥物的化合物信息

11種青霉素類抗生素在2~300 ng/mL范圍內(nèi)，線性良好，相關(guān)系數(shù)R均大于0.999。

部分代表性青霉素類抗生素的校準(zhǔn)曲線

l 樣品加標(biāo)分析結(jié)果

對(duì)市售南美白蝦進(jìn)行分析，未檢出青霉素成分，并且在出峰區(qū)域無(wú)雜峰干擾。以下是在南美白蝦樣品中添加5 μg/kg青霉素得到的加標(biāo)樣品MRM色譜圖。

青霉素加標(biāo)樣品MRM色譜圖(5 μg/kg)

結(jié)語(yǔ)

看了本期的難點(diǎn)項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)分享，相信大家都有所了解，β-內(nèi)酰胺類化合物穩(wěn)定性差，分析測(cè)試過(guò)程尤其注意光照、pH等的影響。除此之外，島津應(yīng)用云后續(xù)還將發(fā)布獸藥分析大講堂系列，聚焦難點(diǎn)項(xiàng)目，陸續(xù)發(fā)布檢測(cè)關(guān)鍵點(diǎn)小貼士及解決方案，幫助大家共克食品安全難關(guān)。

“獸藥分析大講堂系列”后續(xù)預(yù)告

四環(huán)素分析篇

多肽類抗生素分析篇

硝基呋喃分析篇

……

參考文獻(xiàn)

[1] .劉創(chuàng)基.動(dòng)物性食品中β-內(nèi)酰胺類藥物及其代謝物檢測(cè)方法的研究[D].北京化工大學(xué),2010.

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