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上海申知心生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： 高血脂癥動物模型,心血管疾病動物模型,缺血性心臟病動物模型 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2023-08-29 10:40:44瀏覽次數(shù)：2064
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息，謝謝!
| 產(chǎn)地類別 | 國產(chǎn) | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
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實驗原理
流式細胞分選是利用流式細胞分選儀，對細胞的物理、生理、生化、免疫、遺傳、分子生物學(xué)性狀及功能狀態(tài)等進行定性或定量檢測，它可根據(jù)發(fā)射光的熒光強度和波長將發(fā)光顆粒亞群分開并可實現(xiàn)單克隆分選，對復(fù)雜樣本中的細胞進行鑒定、分類、定量和分離。免疫磁珠細胞分選是把細胞用超級順磁性的 MACS MicroBeads （MACS微型磁珠）特異性地標記，磁性標記完后，把這些細胞通過一個放在強而穩(wěn)定磁場中的分選柱。分選柱里的基質(zhì)造成一個高梯度磁場。被磁性標記的細胞滯留在柱里而未被標記的細胞則流出。當(dāng)分選柱移出磁場后，滯留柱內(nèi)的磁性標記細胞就可以被洗脫出來，這樣就*可以獲得標記和未標記的兩個細胞組份。
實驗流程
流式細胞分選
(1)取1式細胞5個待檢測的細胞，加5 ml DPBS洗滌，室溫2000 r/min離心5 min，棄上清，然后用200 μl 0.5% BSA-DPBS重懸細胞；
(2)想細胞懸液中加入熒光染料標記的抗體，4℃孵育30 min；
(3)將染好的細胞用0.5% BSA-DPBS 洗滌兩次，然后用500 μl 0.5% BSA-DPBS重懸，流式細胞儀檢測；
(4)結(jié)果統(tǒng)計分析。
磁珠細胞分選方法
(1)離心收集待分離細胞，用少量PBE孵育液（0.5%BSA、0.08%EDTA，PH7.2），真空抽濾除菌及液體內(nèi)氣體，充分混懸細胞（0.5 ml/1及液體8細胞），加入一抗（10-20 μg/ml終濃度），4℃孵育30 min；
(2)用20倍體積PBE洗細胞一次，再加PBE（0.3 ml/1/ml8細胞）充分混懸細胞后，加入相應(yīng)二抗包被的超微磁珠，混勻后置8~15℃孵育10~15 min；
(3) 將分離柱安裝入磁場中，加入0.5 ml PBE，在重力作用下自然流盡,以預(yù)處理分離柱。
服務(wù)說明
(1)客戶提供：待檢測細胞，分選細胞種類。
(2)公司提供：基本實驗步驟、圖片、數(shù)據(jù)分析結(jié)果。
(3)實驗周期：2-3w，具體需要根據(jù)細胞生長情況及實驗內(nèi)容而定。
