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關于超聲波細胞粉碎機的用法,以下有著詳細介紹

閱讀:871        發(fā)布時間:2022-5-20
  超聲波細胞粉碎機是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內容物包括目的的產(chǎn)物成分釋放出來的技術,是分離純化細胞內合成的非分泌型生化物質的基礎,由于細菌、酵母、真菌、植物細胞壁的組成成分不同,且同類細胞竭誠的網(wǎng)狀結構也不同,所以其細胞壁的堅固程度不同。
 

 

  而動物細胞雖沒有細胞壁,但具有細胞膜,也需要一定的細胞破碎方法來破膜,以此達到提取產(chǎn)物的目的。下面就列舉了幾個重要的方法,可供參考:
  1、化學及生物化學法:
 ?、僮匀芊ǎ涸谝欢≒H和適當?shù)臏囟认拢媒M織細胞內自身的酶系統(tǒng)將細胞破碎的方法。此過程需較長時間,常用少量防腐劑如甲苯、氯仿等防止細胞的污染;
  ②酶溶法:利用各種水解酶,如溶菌酶、纖維素酶、蝸牛酶、半纖維素酶、脂酶等,將細胞壁分解,使細胞內含物釋放出來。有些細菌對溶菌酶不敏感,加入少量巰基試劑或8摩爾尿素處理后,使之轉為對溶菌酶敏感而溶解;
 ?、刍瘜W滲透法:某些有機溶劑、抗生素、表面活性劑、金屬螯合劑、變性劑等化學藥品都可以改變細胞壁或膜的通透性從而使內合物有選擇地滲透出來。其作用機理;化學滲透取決于化學試劑的類型以及細胞壁和膜的結構與組成。
 
  2、物理法:
 ?、俜磸蛢鋈芊ǎ?/div>
  原理:因突然冷凍,細胞內冰晶的形成及胞內外溶劑濃度的突然改變而破壞細胞;
  方法:將待破碎的細胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復幾次,由于細胞內冰粒形成和剩余細胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細胞結構破碎。
 ?、诩睙狍E冷法:
  將材料投入沸水中,維持85-90分鐘,至水浴中急速冷卻,此法可用于細菌及病毒材料;
  就目前超聲波儀器主要有超聲波振蕩器以及超聲波粉碎儀等。
  其優(yōu)點是保持細胞活性,省時,樣品損失少,可以處理大量樣品。因此超聲波細胞粉碎機的不斷發(fā)展和改進,對大規(guī)模生產(chǎn)的貢獻是十分可觀的。超聲波細胞粉碎機進行超聲粉碎破碎是目前在生物生產(chǎn)中常用的破碎方法。對不同菌種的發(fā)酵液。超聲破碎的效果差別較大。一般地,桿菌比球菌較易破碎,革蘭氏陰性細菌細胞比革蘭氏陽性細菌細胞較易破碎,對酵母菌的效果較差。

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