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樣本采集與處理：依據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，收集適量樣本。若是血清，需讓血液自然凝固后離心獲?。谎獫{則要在采血時(shí)添加合適抗凝劑再離心分離；細(xì)胞裂解液需按照規(guī)范流程裂解細(xì)胞并離心去除細(xì)胞碎片等雜質(zhì)。收集處理好的樣本妥善保存，防止反復(fù)凍融。
試劑盒準(zhǔn)備：從冰箱取出試劑盒，室溫（20℃ - 25℃）平衡 30 分鐘，確保試劑盒內(nèi)各試劑溫度一致。同時(shí)準(zhǔn)備好移液器、吸頭、酶標(biāo)儀等實(shí)驗(yàn)器材，并檢查其性能是否正常。
加樣：將標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本及空白對(duì)照按規(guī)定體積準(zhǔn)確加入微孔板相應(yīng)孔中，輕輕振蕩混勻，使樣本與包被抗體充分接觸，然后在設(shè)定溫度下孵育特定時(shí)長(zhǎng)。
洗板：孵育結(jié)束，棄去孔內(nèi)液體，用洗滌液充分洗滌微孔板 3 - 5 次，徹di清除未結(jié)合的物質(zhì)，降低非特異性信號(hào)干擾。每次洗滌后需將微孔板拍干，避免殘留液體影響后續(xù)反應(yīng)。
加酶標(biāo)抗體：向各孔加入適量酶標(biāo)檢測(cè)抗體，振蕩混勻后再次孵育。
顯色與終止：加入底物顯色液，在避光條件下孵育，待顏色變化至合適程度時(shí)，加入終止液終止反應(yīng)，使反應(yīng)停止在最佳檢測(cè)狀態(tài)。
結(jié)果測(cè)定：立即使用酶標(biāo)儀在規(guī)定波長(zhǎng)下測(cè)定各孔 OD 值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣本中 NF-κB 的含量。
高靈敏度：能夠精準(zhǔn)檢測(cè)到極低濃度的 NF-κB，滿足對(duì)微量樣本或低表達(dá)水平的檢測(cè)需求。
特異性強(qiáng)：試劑盒中的抗體對(duì) NF-κB 具有高度特異性，與其他類似物質(zhì)交叉反應(yīng)極小，保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
重復(fù)性好：同一批樣本多次檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定，變異系數(shù)小，為科研及臨床診斷提供可靠且可重復(fù)的數(shù)據(jù)支持。在應(yīng)用方面，NF-κB試劑盒可用于研究炎癥性疾病的發(fā)病機(jī)制、評(píng)估腫瘤的發(fā)展進(jìn)程等，為醫(yī)學(xué)研究和臨床實(shí)踐提供有力的數(shù)據(jù)支撐。