員.png)
12
NAG ELISA 技術(shù)簡介
N - 乙酰 -β-D - 氨基葡萄糖苷酶（NAG）是一種廣泛存在于人體組織和體液中的溶酶體酶。NAG ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測定）技術(shù)是檢測生物樣本中 NAG 含量的重要手段，在醫(yī)學(xué)診斷、疾病監(jiān)測等領(lǐng)域發(fā)揮著關(guān)鍵作用。
其基本原理基于抗原抗體的特異性結(jié)合。在 NAG試劑盒實(shí)驗(yàn)中，首先將針對 NAG 的特異性抗體固定在固相載體（如 96 孔酶標(biāo)板）表面。加入待檢測樣本后，若樣本中存在 NAG，它會(huì)與固相抗體發(fā)生特異性結(jié)合。隨后加入酶標(biāo)記的另一種 NAG 特異性抗體，形成 “固相抗體 - NAG - 酶標(biāo)抗體" 復(fù)合物。洗去未結(jié)合的物質(zhì)后，加入酶的底物。酶催化底物發(fā)生顯色反應(yīng)，顏色的深淺與樣本中 NAG 的含量成正比，通過酶標(biāo)儀測定吸光度，即可根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣本中 NAG 的濃度。
操作流程相對規(guī)范且細(xì)致。樣本需經(jīng)過預(yù)處理，確保其適合檢測。之后依次進(jìn)行加樣、孵育、洗滌、加酶標(biāo)抗體、再次孵育、洗滌以及加底物顯色等步驟。每一步的時(shí)間、溫度和試劑用量都需嚴(yán)格控制，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。
在醫(yī)學(xué)上，NAG試劑盒應(yīng)用廣泛。例如在腎臟疾病診斷中，腎臟受損時(shí)，腎小管上皮細(xì)胞中的 NAG 會(huì)釋放到尿液中，通過檢測尿 NAG 水平，能早期發(fā)現(xiàn)腎臟功能異常，對腎病的診斷、病情監(jiān)測及療效評估具有重要意義。此外，在糖尿病、高血壓等慢性病患者中，定期檢測 NAG 含量，有助于及時(shí)發(fā)現(xiàn)腎臟等靶器官的潛在損傷。