小鼠肺部活化調節(jié)趨化因子試劑盒：精準檢測的得力工具
小鼠肺部活化調節(jié)趨化因子試劑盒，在科研與醫(yī)學研究領域發(fā)揮著關鍵作用，為深入探究相關生理病理機制提供有力支持。該試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA），能夠精準測定標本中小鼠肺部活化調節(jié)趨化因子（PARC/CCL18）的水平。
試劑盒的核心原理基于抗原抗體的特異性結合。首先，將純化的小鼠肺部活化調節(jié)趨化因子（PARC/CCL18）抗體包被于微孔板，制成固相抗體。當往包被單抗的微孔中依次加入標本、標準品以及 HRP 標記的檢測抗體后，若標本中存在肺部活化調節(jié)趨化因子（PARC/CCL18），其會先與固相抗體結合，進而再與 HRP 標記的抗體結合，形成抗體 - 抗原 - 酶標抗體復合物。經(jīng)過徹di洗滌去除未結合物質后，加入底物 TMB。在 HRP 酶的催化下，TMB 轉化成藍色，并在酸的作用下最終轉變?yōu)辄S色。顏色的深淺與樣品中的肺部活化調節(jié)趨化因子（PARC/CCL18）含量呈正相關，通過酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值），再依據(jù)標準曲線即可精確計算出樣品中小鼠肺部活化調節(jié)趨化因子（PARC/CCL18）的濃度。
在樣本處理方面，該試劑盒具有廣泛的適用性。血清樣本，需將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置 2 小時或 4℃過夜，隨后 1000×g 離心 20 分鐘，取上清備用，上清也可置于 - 20℃或 - 80℃保存，但要避免反復凍融；血漿樣本，以 EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本，在采集后的 30 分鐘內于 2 - 8℃、1000×g 離心 15 分鐘，取上清用于檢測，同樣需注意避免反復凍融；組織勻漿樣本，先用預冷的 PBS (0.01M, pH = 7.4) 沖洗組織以去除殘留血液，稱重后剪碎，按 1:9 的重量體積比（如 1g 組織對應 9mL PBS，可根據(jù)實驗需求適當調整）加入含蛋白酶抑制劑的 PBS 于玻璃勻漿器中，在冰上充分研磨，還可通過超聲破碎或反復凍融進一步裂解細胞，最后 5000×g 離心 5 - 10 分鐘，取上清檢測；細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本，則直接 1000×g 離心 20 分鐘，取上清即可檢測，也可低溫保存并避免反復凍融。
操作該試劑盒時，從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條密封放回 4℃。除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體 100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。之后棄去液體，在吸水紙上拍干，每孔加滿 350μL 洗滌液，靜置 1min 后甩去洗滌液并拍干，如此重復洗板 5 次（也可用洗板機洗板）。接著每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min，再加入 50μL 終止液，15min 內于 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。
小鼠肺部活化調節(jié)趨化因子（PARC/CCL18）在免疫反應中扮演重要角色，能吸引淋巴細胞參與 B 細胞遷移到 B 細胞濾泡淋巴結，對初始 T 淋巴細胞、CD4 + 和 CD8 + T 細胞也具有趨化活性。該試劑盒憑借其高靈敏度、特異性強、操作相對簡便、檢測快速以及結果穩(wěn)定等優(yōu)勢，可用于定量檢測體液中抗原成分，在生化領域應用廣泛，助力科研人員深入開展相關研究，推動相關領域的知識拓展與技術進步。
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