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活體細胞線粒體膜通道孔(MPTP)紅色熒光(TMRM)檢測

閱讀:1561          發(fā)布時間:2015-4-16
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主要用途


 活體細胞線粒體膜通道孔(MPTP)紅色熒光(TMRM)檢測試劑是一種旨在通過四甲基羅丹明染料,選擇性地聚集在線粒體內(nèi)呈現(xiàn)熒光染色,一旦釋放到細胞漿,即刻發(fā)生熒光淬滅,來分析和觀察線粒體膜通道孔活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種活體細胞線粒體(動物、人體、昆蟲等)膜通道孔活性(開放狀態(tài))的檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,活體檢測,分辨率高,操作簡捷,性能穩(wěn)定。


技術(shù)背景


線粒體膜通道孔(mitochondrial permeability transition pore;MPTP)是由線粒體內(nèi)外膜成分構(gòu)成的非特異性且鈣離子依賴性通道。在細胞凋亡或壞死時,線粒體內(nèi)容物通過膜通道孔釋放到胞漿中。線粒體膜電位的去極化(depolarization),導(dǎo)致膜通道孔的開放,顯著改變線粒體的通透性,使之線粒體膨脹(swelling),內(nèi)容物釋放其中鈣離子過度進入、線粒體谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等導(dǎo)致膜通道孔的持續(xù)開放,而造成細胞色素C的釋放和線粒體膜電位的消失。四甲基羅丹明(tetramethylrhodamine methyl ester;TMRM),為羅丹明衍生物陽離子染料,作為電勢測定(potentiometric)熒光探針:*,具有親脂性的; 第二,與線粒體內(nèi)負電極結(jié)合而聚集;第三,容易進入細胞及其線粒體。四甲基羅丹明進入細胞后,被細胞內(nèi)酯酶切離,產(chǎn)生四甲基羅丹明。四甲基羅丹明進入線粒體后,被線粒體俘獲,呈現(xiàn)強烈熒光。一旦線粒體膜通道孔開放,四甲基羅丹明釋放出來而在胞漿重新分布,其熒光性顯著降低。線粒體內(nèi)熒光的變化,表明膜通道孔的開放狀態(tài)。

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