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細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶-3活性比色法定量檢測(cè)
閱讀：963 發(fā)布時(shí)間：2015-4-7| 提 供 商 | 上海哈靈生物科技有限公司 | 資料大小 | 34KB |
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| 資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數(shù) | 963次 |
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主要用途
細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶-3活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)四肽化合物底物Ac-DEVD-pNA，受到半胱氨酸蛋白酶-3的水解，釋放黃色對(duì)硝基苯胺，產(chǎn)生吸光峰值的變化，即采用比色法來(lái)測(cè)定細(xì)胞裂解萃取樣品中酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體、昆蟲(chóng)等）半胱氨酸蛋白酶-3（CASPASE-3）的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。
技術(shù)背景
半胱氨酸蛋白酶（Cysteine-requiring Aspartate protease；CASPASE），或稱半胱天冬蛋白酶，是調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的一類蛋白酶家屬。半胱氨酸蛋白酶-3 （CASPASE-3；EC3.4.22.56）是半胱氨酸蛋白酶家屬中CED-3（Cell Death Gene Number 3；秀麗隱桿線蟲(chóng)細(xì)胞死亡基因數(shù)3）分支的一種，又稱CPP32（Cysteine Proteinase Protein 32 kd；半胱氨酸蛋白酶蛋白32）、apopain（凋亡素）、Yama（印度傳說(shuō)中的死亡之神）等。半胱氨酸蛋白酶-3前體為32kd，被切離為17kd和11kd而激活細(xì)胞凋亡。其底物是多聚ADP-核糖多聚酶（poly（ADP-ribose）polymerase；PARP）、半胱氨酸蛋白酶激活DNA酶抑制劑（ICAD）等。半胱氨酸蛋白酶-3的活性檢測(cè)用來(lái)評(píng)價(jià)細(xì)胞或組織的凋亡狀況。基于人工合成的四肽化合物底物Ac-DEVD-pNA（acetyl-Asp-Glu-Val-Asp -p-Nithoaniline；乙酰天冬氨酰谷氨酰頡氨酰天冬氨酰對(duì)硝基苯胺）受到半胱氨酸蛋白酶-3的水解，釋放有色對(duì)硝基苯胺，在分光光度儀（405nm 波長(zhǎng)）下，測(cè)定吸光峰值的變化，來(lái)定量測(cè)定半胱氨酸蛋白酶-3的活性。半胱氨酸蛋白酶-3反應(yīng)系統(tǒng)為：