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技術(shù)文章

乳酸脫氫酶(LDH)釋放法細胞繁殖與毒性定量檢測試劑盒

閱讀:1585          發(fā)布時間:2022-8-2

主要用途 乳酸脫氫酶(LDH)釋放法細胞繁殖與毒性定量檢測試劑是一種旨在通過酶聯(lián)連續(xù)反應(yīng)系統(tǒng)檢測由于細胞損 傷導致的細胞內(nèi)穩(wěn)定的乳酸脫氫酶釋放到細胞外,使四唑鹽染料碘硝基氯化四氮唑(INT)還原為紅色甲臜 farmazan),即比色法定量測定酶活性,以評價活體細胞繁殖的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心 研制、成功實驗證明的。適用于各種藥物、化學、環(huán)境因子和營養(yǎng)因子處理的貼壁或懸浮生長中的動物或人 體細胞。替代傳統(tǒng)的同位素[51 Cr]釋放檢測的。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,簡捷敏感,性能穩(wěn)定, 顯色清晰,檢測準確,重復性好。


產(chǎn)品內(nèi)容 

裂解液(Reagent A毫升 補充液(Reagent B毫升 反應(yīng)液(Reagent C毫升 顯色液(Reagent D毫升 終止液(Reagent E毫升 標準液(Reagent F微升(另購) 產(chǎn)品說明書


用戶自備 

96 孔細胞培養(yǎng)板:用于細胞操作的容器 細胞培養(yǎng)箱:用于孵育反應(yīng) 孔板離心機:用于沉淀細胞 酶標儀:用于定量檢測染色后的細胞


質(zhì)量標準 1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定 

                      2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感

關(guān)鍵步驟

1. 本產(chǎn)品為 100 次(1 96 孔板)操作 

2. 操作時須戴手套 3. 整個操作須無菌操作 

4. 建議每個樣品安排 3 個孔,即重復 3 次,計算時取其平均值 

5. 檢測體系相應(yīng)增加,試劑用量按比例相應(yīng)增加:例如 200 微升檢測體系,試劑用量增加 1 倍 

6. 每孔中的培養(yǎng)液需 100 微升,避免使用周邊培養(yǎng)孔(常常液體蒸發(fā)而減少) 

7. 系統(tǒng)測試,可以加入 10 微升標準液(Reagent G50 微升無細胞的細胞培養(yǎng)液里,然后加入反應(yīng)液 和顯色液即可 

8. 細胞裂解效果不佳,可以使用 20 微升裂解液(Reagent A處理 

9. 孵育時,須避光

10.染色完成后,建議即刻檢測,最遲不得超過 1 小時 

11.細胞培養(yǎng)和處理時,避免使用草酸(OXALATE),草氨酸(OXAMATE)和 EDTA,否則影響檢測的準 確性 

12.血清含有乳酸脫氫酶,建議使用濃度不要超過 1% 

13.細胞過度生長、密度過高、離心速度過大、培養(yǎng)箱內(nèi)外溫差過大等因素會造成細胞自然釋放乳酸脫氫酶 

14.酚紅會干擾檢測 

15.樣品最大酶活性對照孔或最大 OD 吸光讀數(shù)與細胞裂解程度密切相關(guān) 

16.如果用戶沒有孔板離心機,則移取上清液時格外小心 

17.如果用戶沒有匹配的波長,可以使用波長 470nm 570nm 之間的任一波長替代 

18.本公司提供系列細胞繁殖檢測試劑產(chǎn)品



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