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蛋白胨 10g,牛肉膏 3g,乳糖5g,氯化鈉 5g,1.6%溴甲酚紫乙醇液 1.0mL,蒸餾水 1000mL,pH 7.2~7.4。
按上述普通乳糖蛋白胨培養(yǎng)液濃縮三倍配制,分裝于有杜漢氏小管的試管中,每管5mL。
蛋白胨 10g, 乳糖 10g,K2HPO4 3.5g,瓊脂 15~20g,蒸餾水1000mL,無水亞硫酸鈉 5g,5%的堿性品紅乙醇溶液 20mL,pH 7.2~7.4。
4、伊紅美藍培養(yǎng)基(EMB培養(yǎng)基)(供發(fā)酵法平板分離用,3和4可任選一種)
蛋白胨10g,乳糖10g,K2HPO4 2.0g,瓊脂20g,蒸餾水1000mL,2%伊紅(曙紅)水溶液 20mL,5%美藍(亞甲藍)水溶液13mL,pH 7.2~7.4。
(二)滅菌移液管、滅菌稀釋水、試管、杜漢氏小管、革蘭氏染色液、滅菌培養(yǎng)皿。
1、自來水取樣:應(yīng)在水打開放水5min ,再用無菌容器接取水樣,待分析。如水樣內(nèi)含有余氯,則采樣瓶滅菌后按每500mL水樣加3%Na2S2O3.5H2O溶液1mL。
若實驗所測定的15支管中均為陽性反應(yīng),說明濃水樣污染嚴重,可將樣品進一步稀釋后,再按上述方法接種、培養(yǎng)和觀察。
(3)先對試管輕擊并使之傾斜,以免接種針挑取到任何膜狀物或浮渣;
(4)劃線時要用針尖的彎曲部分接觸瓊脂培養(yǎng)基平面.以免刮傷或戳破培養(yǎng)基。劃線后培養(yǎng)皿倒置,于37℃培養(yǎng)18~24h。
如果初發(fā)酵接種水樣量為10mL、1mL、0.1mL,可直接查表求出原水樣100mL中大腸菌群指數(shù)(MPN)。如果接種水樣量低于上述水樣量,則經(jīng)下面的換算式計算。
目前我國系以1L水樣中的菌數(shù)為報告值,即為MPN×10。
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