熒光抗體稀釋液公司正在銷售的產(chǎn)品：白三烯B4(LTB4)試劑盒Anti-OR2T10 Antibody小鼠戊糖素
雌酮(E1)試劑盒Anti-OR2T2 Antibody大鼠膠原酶II
甲酰甲硫(fMet)試劑盒 Anti-OR2T11 Antibody小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物
可替丁(Cotinine)試劑盒Anti-OR2T11 Antibody人白介素-5
雌二(E2)試劑盒Anti-OR2

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

產(chǎn)品分類：免疫組化

儲存條件：室溫,12個月  

用途：熒光抗體稀釋,消除熒光抗體非特異性染色,可以用于減緩各種常見熒光抗體的熒光淬滅。Leagene熒光抗體稀釋液主要由Kolmers鹽溶液、抗熒光衰減劑組成。

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

*櫻桃鏈格孢環(huán)化核苷調(diào)控陽離子通道蛋白亞型4Human SLC7A4 ELISA Kit大鼠α干擾(IFN-α)免疫試劑盒

漢遜德巴酵母HEAT重復內(nèi)含蛋白8蛋白抗體Human SLC5A3 ELISA Kit大鼠α-輔肌動蛋白1(ACTN-1)免疫試劑盒

稀疏鏈霉菌稀疏變種雄激調(diào)節(jié)樣蛋白抗體Human SLTM ELISA Kit大鼠αL巖藻糖苷(AFU)免疫試劑盒

芽孢桿菌雄激調(diào)節(jié)蛋白2抗體Human SLC6A8 ELISA Kit大鼠α2巨球蛋白(α2-MG)免疫試劑盒

三葉草根瘤菌角化蛋白S100A18抗體Human SLC38A3 ELISA Kit大鼠α2-HS糖蛋白(AHSG)免疫試劑盒

產(chǎn)黑色鏈霉菌型肝炎病NS4B抗體Human SLC38A4 ELISA Kit大鼠α1微球蛋白(α1-MG)免疫試劑盒

黃桿菌異質(zhì)性核糖核蛋白C1/C2抗體Human SLC9A11 ELISA Kit大鼠α1性糖蛋白(α1-AGP)免疫試劑盒

藍色犁頭霉異質(zhì)性核糖核蛋白RHuman SLC3A1 ELISA Kit大鼠α1抗前體(pre-α1-AT)免疫試劑盒

白地霉同源相互作用蛋白激4抗體Human SLC9A9 ELISA Kit大鼠VGF神經(jīng)生長因子誘導蛋白(VGF)免疫試劑盒

球毛殼菌肝輔助因子II抗體Human SLCO6A1 ELISA Kit大鼠U型肌激,線粒體(CKMT1A)免疫試劑盒

鉤狀木霉組蛋白替換精蛋白DGGR1抗體Human SLC43A1 ELISA Kit大鼠T活化核因子5(NFAT5)免疫試劑盒

鏈格孢屬透明質(zhì)及粘蛋白4抗體Human SLC44A1 ELISA Kit大鼠Toll樣受體9(TLR9)免疫試劑盒

綠葉假單胞菌神經(jīng)特異性鈣結(jié)合蛋白抗體Human SLCO4C1 ELISA Kit大鼠Toll樣受體7(TLR-7)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌無毛發(fā)蛋白抗體Human APC(Adenomatous polyposis coli protein) ELISA Kit大鼠Toll樣受體4(TLR4)免疫試劑盒

東方伊薩酵母心臟和神經(jīng)嵴衍生蛋白2抗體Human SLC45A2 ELISA Kit大鼠toll樣受體3(TLR3)免疫試劑盒

短小芽孢桿菌乙酰化組蛋白H4(K16)抗體Human SLC47A1 ELISA Kit大鼠toll樣受體1(TLR1)免疫試劑盒

粉狀畢赤酵母Pichia│farinosa 質(zhì)量規(guī)格：分析標準品芹菜-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷

馬腺疫鏈球菌獸疫亞種Streptococcus│equi subsp.zooepidemicus 質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=5%川續(xù)斷皂苷VI

短芽孢桿菌Bacillus│brevis 質(zhì)量規(guī)格：分析標準品異甘草
熒光抗體稀釋液CCK ELISA Kit  大鼠膽囊收縮su/腸促胰mei肽規(guī)格： 48T

BGP/Gehrelin ELISA Kit  大鼠腦腸肽規(guī)格： 48T

6-K-PG ELISA Kit  大鼠6tong前列腺su規(guī)格： 48T

apo-A1 ELISA Kit  大鼠載脂蛋白A1規(guī)格： 48T

apo-B0 ELISA Kit  大鼠載脂蛋白B0規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。