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全光譜熒光定量PCR儀——qTOWERiris

閱讀:57      發(fā)布時間:2025-4-3
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核酸蛋白  全能檢測

 

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如果你還不知道熒光定量PCR儀可以用來做蛋白檢測和分析,

那你就是“奧特曼”啦!

如果你正好在開展蛋白尤其是膜蛋白相關(guān)的科研工作,

那么恭喜你,

你又可以多一個好使的研究工具啦!

它就是新一代全光譜熒光定量PCR儀

qTOWERiris系列

 

全光譜檢測,拓展蛋白應(yīng)用


qTOWERiris突破性地將檢測光譜范圍拓寬到了波長更短的紫外光區(qū)域,覆蓋從近紫外UVA到近紅外NIR的全光譜范圍,波長從360nm到730nm。這一革新性的變化,大大擴展了熒光定量PCR儀的應(yīng)用場景。

1、 近紫外光區(qū)域的核酸檢測應(yīng)用,為做核酸多重檢測的用戶提供了更多的選擇,比如可以檢測ATTO390ATTO425核酸標(biāo)記熒光染料的信號;

2、 蛋白檢測方面的應(yīng)用,比如說可以利用蛋白熔解曲線分析功能,開展CPM、ANS等熒光染料標(biāo)記的蛋白熱穩(wěn)定性檢測、蛋白與配體互作研究、蛋白結(jié)晶和儲存體系優(yōu)化等;

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在蛋白相關(guān)研究中,膜蛋白以其強大的功能性和生物學(xué)活性,成為非常重要的研究靶點,如細胞的增殖和分化、能量轉(zhuǎn)換、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、物質(zhì)運輸?shù)?,都與膜蛋白息息相關(guān),而且估計有60%左右的藥物作用都與膜蛋白有關(guān)。

由于在膜蛋白樣品制備過程中,需要用到一定濃度的表面活性劑,來使脂膜解體釋放膜蛋白并維持去膜狀態(tài)下膜蛋白結(jié)構(gòu)和功能的穩(wěn)定性,因此膜蛋白樣品溶液中往往含有較多的表面活性劑。如果用普通的熒光染料如SYPRO Orange去標(biāo)記膜蛋白,因其溶解性不好、背景噪音高而達不到好的檢測效果,此時如果換成CPM熒光染料(C24H22N2O4)就能很好地實現(xiàn)膜蛋白熔解曲線檢測和分析。

CPM的激發(fā)光Ex為384nm,檢測光Em為470nm,在近紫外區(qū)域,那么問題來了,普通的熒光定量PCR儀,激發(fā)光譜往往從450nm左右的藍光區(qū)域開始,沒有辦法實現(xiàn)CPM的檢測。而耶拿公司的qTOWERiris的紫外通道,檢測光譜正好匹配CPM染料,很好地滿足了CPM標(biāo)記的膜蛋白的高靈敏度檢測。

除了CPM熒光染料,ANS(8-苯胺基-1-萘磺酸)也是一種常用的蛋白標(biāo)記熒光染料,和蛋白的結(jié)合性好,本底低。ANS的激發(fā)光Ex為380nm,檢測光Em為470nm,也正是位于qTOWERiris紫外通道的檢測范圍。因此,qTOWERiris能為開展蛋白研究的用戶提供非常方便的熔解曲線分析,進而快速獲得蛋白熱穩(wěn)定性、蛋白和小分子互作、蛋白結(jié)晶條件優(yōu)化等方面的信息。

 

典型的蛋白熔解曲線結(jié)果:

 

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     圖1. 蛋白熔解曲線原始信號圖

 

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    圖2. 蛋白熔解曲線峰值圖

 

 

?qTOWERiris還能為您帶來可靠的檢測結(jié)果和人性化的使用體驗。

 

溫控精準(zhǔn),重復(fù)性好


延續(xù)了耶拿PCR儀經(jīng)典的鍍金純銀樣品槽和快準(zhǔn)穩(wěn)的高速PCR技術(shù),最大升溫速率可達8℃/s,溫度準(zhǔn)確性±0.1℃,精準(zhǔn)的溫控是實現(xiàn)準(zhǔn)確熔解曲線分析的重要前提,再結(jié)合先進的光學(xué)檢測系統(tǒng),不存在樣品間的邊緣效應(yīng),提供更好的檢測重復(fù)性。


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