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全自動細胞計數儀在單細胞測序中的應用

閱讀:777        發(fā)布時間:2023-5-27

細胞計數采用的方法?
傳統方法:臺盼藍染色法
臺盼藍染色是對死活細胞進行分別計數的方法之一,染色原理是臺盼藍不能透過活細胞完整的細胞膜,故活細胞不著色;而死亡細胞的細胞膜損傷,染料透過細胞膜在細胞內富集而使細胞著藍色。不過,臺盼藍染色并不一定能準確分辨有核細胞和細胞碎片,因此它往往低估細胞總數而高估細胞活力。

熒光細胞計數方法
吖啶橙/碘化丙啶(AO/PI)染色原理:活細胞經AO染色發(fā)出綠色熒光,而死細胞經PI染色發(fā)出紅色熒光。重要的是,對背景復雜的細胞,比如說外周血單個核細胞,含有細胞碎片較多或成簇的細胞計數,避免了細胞碎片的檢測。這種方法最近也應用在單細胞基因組學應用上,其中綠色對應了完整細胞,而紅色對應了成功分離的細胞核。這種策略讓研究人員能夠計算未裂解的殘留細胞占總細胞數的百分比,同時對細胞核進行計數,提示樣本質量,幫助研究人員確定是否繼續(xù)進行單細胞基因組學流程。

全自動熒光細胞分析儀
JSY-FL-045N型熒光細胞分析儀,明場+雙色熒光通道的結合使實驗更加簡單快捷,同時還具備轉染檢測功能,更加拓寬了檢測的寬度。檢測細胞種類更加龐大,不僅適用于單純的培養(yǎng)細胞,對從組織中、骨髓中、外周血、肺泡中、肝臟中分離出的種類和來源差異較大的細胞標本,也可以快速的計數和分析。通過熒光標記技術和圖像分類識別技術對顯微獲取的熒光數字圖像自動進行分析,獲取細胞的死活狀態(tài)、凋亡情況以及實現細胞的分類。

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