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電泳槽常見問題及解決辦法

閱讀:2361        發(fā)布時間:2017-4-18

電泳槽時凝膠時間不對,那么通常膠在60min,1H內(nèi)凝,如果凝的太慢,可能是TEMEN,APS劑量不夠或者失效。APS應該現(xiàn)配現(xiàn)用,TEMED不穩(wěn)定,容易被氧化成黃色。如果凝的太快,可能是APS和TEMED用量過多,此時膠太硬易裂,電泳時易燒膠。

紋理和托尾現(xiàn):由于樣品溶解不佳引起的,克服的方法可以在加樣前離心,增加一些增溶輔助試劑如尿素。

蛋白帶過寬,與鄰近泳道的蛋白帶相連時由于加樣量太多,可以減少上樣量。

電泳時間比正常要長。可能由于凝膠緩沖系統(tǒng)和電極緩沖系統(tǒng)的PH選擇錯誤,即緩沖系統(tǒng)的PH和被分離物質(zhì)的等電點差別太小,或緩沖系統(tǒng)的離子強度太高。

指示劑成微笑符號(指示劑前沿呈現(xiàn)向上的曲線形),說明凝膠的不均勻冷卻,中間部分冷卻不好,導致分子有不同的遷移率所致。

指示劑成哭臉符號(指示劑前沿呈現(xiàn)向下的曲線形),由于電泳槽的裝置不合適,尤其是凝膠和玻璃板組成的“三明治”底部有氣泡或靠近隔片的凝膠聚合不*。

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