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“上海恒遠”文獻：IL-37 抑制 IL-18 在大鼠肺纖維化模型中的表達及意義的探討①

孫云暉 王一新 馬雪梅 章 婷 趙艷景 ( 佳木斯大學附屬醫(yī)院，佳木斯 154003)

中圖分類號  Ｒ392. 12 文獻標志碼   A 文章編號 1000-484X( 2017) 10-1464-04

    ［摘 要］ 目的: 初步研究博來霉素致肺纖維化大鼠肺組織中 IL-37、IL-18 的表達水平，探討其在 PF 發(fā)生、發(fā)展中的表達及意義。方法: 將 45 只清潔級 Wistar 大鼠按隨機數(shù)字表法分為健康對照組( N 組) 、博來霉素組( B 組) 、地塞米松治療組( D 組) ，每組大鼠各 15 只，B 組及 D 組大鼠給予氣管內注射博來霉素 4  mg / kg 制作肺纖維化模型，N 組給予相同體積生理鹽水作為對照，D 組大鼠于肺纖維化造模基礎上第2 天每日腹腔注射地塞米3 mg / kg，N、B 組大鼠腹腔注射生理鹽水作為對照。各組大鼠分別于造模后第 7、14、28 天處死，HE 染色評價肺組織病理形態(tài)學變化，堿水解法及酶聯(lián)免疫吸附法分別測定肺組織勻漿中羥脯氨酸( HYP) 、IL-37 含量，ＲT-PCＲ 法測定肺組織中IL-18mＲNA 表達量。結果: ①HE 染色顯示B、D 組大鼠肺組織病理學改變由肺泡炎癥逐漸發(fā)展為纖維化，B、D 組 HYP 含量隨時間推移逐漸升高，以第 28 天為著( P＜0. 05) ; ②B、D 組 IL-37、IL-18mＲNA 表達于第 7 天升高至高點，后逐漸降低，至第 28 天均高于 N 組，差異有統(tǒng)計學意義( P ＜ 0. 05) ; ③D 組 IL-37、IL-18mＲNA 表達在同一時間均低于 B 組( P＜0. 05) 。

    結論: IL-37、IL-18 在大鼠肺纖維化發(fā)病早期起重要作用，可能參與了肺纖維化發(fā)生與發(fā)展。

肺纖維化( Pulmonary  fibrosis，PF)  是一種原因不明的慢性間質性肺部疾病，其病理主要表現(xiàn)為彌漫性肺泡炎、肺泡結構紊亂、細胞外基質( Extracell-lar matrix，ECM) 大量沉積等［1］。有研究報道肺纖維化是由肺組織受到損傷后，修復調節(jié)失控及重建異常引起的病理改變，是一系列細胞因子、炎性因子、生長因子等通過多條信號轉導通路共同作用的結果［2］。IL-37 是 IL-1 家族新發(fā)現(xiàn)的細胞因子，有研究報道 IL-37 可通過負反饋調節(jié)機制調節(jié)先天性及固有免疫應答，抑制促炎細胞因子、趨化因子等的產(chǎn)生和對基因轉錄調節(jié)［3］。IL-18 通過調控多種細胞信號轉導通路，促進炎癥發(fā)生、細胞分化、細胞因子等作用［4］。本實驗建立博來霉素致大鼠肺纖維化模型，探討 IL-37 / IL-18 軸在其發(fā)病中的作用及意義，可為闡明這類疾病發(fā)病機制及治療提供新思路。

1材料與方法

1. 1 材料

1. 1. 1 實驗動物 健康清潔級 Wistar 大鼠 45 只

( 雌雄各半) ，6 周齡，體重 180 ～ 220  g，由哈爾濱醫(yī)科大學實驗動物學部提供［許可證號: SCXK ( 黑) 2013-001］，隨機分為健康對照組( N 組) 、博來霉素組( B 組) 和地塞米松治療組( D 組) ，每組各 15 只大鼠，于佳木斯大學動物中心飼養(yǎng)。

1. 1. 2 實驗材料與試劑 注射用鹽酸博來霉素

BLM( 海正輝瑞制藥有限公司提供) ; HE 染色試劑( 湖北錦源醫(yī)療科技有限公司提供) ; Nikon eclipse50i 顯微鏡( 北京中儀光科科技發(fā)展有限公司提供) ; IL-37 大鼠 ELISA 試劑盒( 上海恒遠生物科技有限公司提供) ; 大鼠 HYP 試劑盒( 上海勁馬實驗設備有限公司提供) ; ＲNA 提取試劑盒( 北京艾德萊生物科技有限公司) ; cDNA 反轉錄試劑盒及 PCＲ 試劑盒( 大連寶生物工程有限公司) 。

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