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技術(shù)文章

大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)elisa試劑盒手冊

閱讀:743          發(fā)布時(shí)間:2022-9-7

大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)檢測范圍:

10ng/L -340ng/L

大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)使用目的:

本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)含量。

大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)實(shí)驗(yàn)原理:

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)水平。用純化的大鼠CRF抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF),再與HRP標(biāo)記的CRF抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)濃度。

大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)標(biāo)本要求 :

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)計(jì)算:

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)注意事項(xiàng):

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)保存條件及有效期:

1.試劑盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6個(gè)月

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