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PNPP片劑/4264-83-9 （Active Ingredient）/5 MG PNPP SUBSTRATE TABLETS/0405-1KT方法二 用于檢測(cè)未知抗體的間接法： 用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml， 每孔加0.1ml，4℃過(guò)夜。次日洗滌3次。通過(guò)方法與實(shí)驗(yàn)室之間的測(cè)量預(yù)比對(duì)可以確認(rèn)各方法與實(shí)驗(yàn)室在實(shí)驗(yàn)條件、操作程序方面已經(jīng)得到了很好的控制，之間的*性較好。測(cè)量預(yù)比對(duì)通常采取與所研制標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)基體相同或近似、濃度水平相近的另一份均勻樣品來(lái)進(jìn)行，而不能采取所研制的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)樣品。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線，計(jì)算各自的結(jié)合率，求出各自在 IC50時(shí)的濃度，并按下列公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。為了對(duì)樣品的均勻性作zui終確認(rèn)，應(yīng)盡可能抽取不同的樣品單元用于每一組定值測(cè)量。當(dāng)協(xié)作研究的結(jié)果用于確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)均勻性時(shí)，每個(gè)參與實(shí)驗(yàn)室則至少應(yīng)測(cè)定三或四個(gè)單元。應(yīng)根據(jù)方法確認(rèn)中確定的各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件及參數(shù)，開(kāi)展測(cè)量工作。在標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制階段，做好各項(xiàng)測(cè)量實(shí)驗(yàn)條件及參數(shù)的記錄是非常重要的，可為以后復(fù)制階段的定值工作提供很好的依據(jù)。

名稱：PNPP片劑
品牌：AMRESCO
Item Description：5 MG PNPP SUBSTRATE TABLETS
Code：0405-1KT
級(jí)別：試劑級(jí)
CAS：4264-83-9 （Active Ingredient）
Size：1 Kit
Shipping Temperature：COLD
Hazardous Shipping Charges Apply*：No
Hazard Label for Container*：IRRITANT*LIGHT SENSITIVE*
UN#*：
UNSPSC #：12352200
Shelf Life from Date of Manufacture**：2 years
Parent Category：Substrates
Child Category：Alkaline Phosphatase
Grade：REAGENT GRADE


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動(dòng)物脾臟有上百萬(wàn)種不同的B淋巴細(xì)胞系，具有不同基因不同的B淋巴細(xì)胞合成不同的抗體。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線，計(jì)算各自的結(jié)合率，求出各自在 IC50時(shí)的濃度，并按下列公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。elisa試劑盒組成及試劑配制：1. 酶聯(lián)板：一塊（96孔） 2. 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為1,600 pg/ml，將其稀釋為400 pg/ml后，再做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e稀釋成400 pg/ml，200 pg/ml，100 pg/ml，50 pg/ml，25 pg/ml，12.5 pg/ml，6.25 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。如配制200 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml （不要少于0.5ml ） 400 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類(lèi)推。3. 樣品稀釋液：1×20ml。4. 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。5. 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。6. 檢測(cè)溶液A：1×120μl（1:100）臨用前以檢測(cè)稀釋液A 1:100稀釋?zhuān)♂屒案鶕?jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（100μl/孔），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl檢測(cè)溶液A加990μl檢測(cè)稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。7. 檢測(cè)溶液B：1×120μl/瓶（1:100）臨用前以檢測(cè)稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A。8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 9. 濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 10. 終止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。 11. 覆膜：5張12. 使用說(shuō)明書(shū)：1份 ELISA試劑盒標(biāo)本要求 ：標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔 中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。（同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照） ↓ 于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體（抗抗體）0.1ml， 37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)自備物品 1. 酶標(biāo)儀（建議參考儀器使用說(shuō)明提前預(yù)熱） 2. 微量加液器及吸頭，EP管3. 蒸餾水或去離子水，全新濾紙
關(guān)鍵詞：STRATE TABLETS/0405-1KT