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熒光 NEXT 膠, 12.5%//FLUORESCENT NEXT GEL 12.5%/M291-100ML-KIT當(dāng)這種測(cè)量程序僅僅是為了粗略估計(jì)方法的正確度或精密度,或常規(guī)質(zhì)量控制計(jì)劃中使用的“盲樣",以及分析者之間水平高低比較時(shí),并不需要有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)已經(jīng)充分確定的標(biāo)準(zhǔn)值和不確定度作為依據(jù),這時(shí)就可以使用上面提及的一些物質(zhì)。在這種情況下,如果有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的供應(yīng)不足或價(jià)格極為昂貴,再堅(jiān)持使用有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),就可能是一種誤用。 (6) TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液: TMB(10mg/5ml無(wú)水乙醇) 0.5ml 底物緩沖液(PH5.5) 10ml 0.75%H2O2 32μl 指抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。這種反應(yīng)即可在機(jī)體內(nèi)進(jìn)行,也可以在機(jī)體外進(jìn)行。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱(chēng)洗滌,下同)。 可以作為抗原的物質(zhì)有很多種,一般的科研實(shí)驗(yàn)中,經(jīng)常使用的抗原有:偶聯(lián)多肽、偶聯(lián)的小分子或化合物、天然或重組蛋白等等。elisa反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀(guān)察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過(guò)強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。

熒光 NEXT 膠, 12.5%

FLUORESCENT NEXT GEL 12.5%
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*抗體就是能和非抗體性抗原特異性結(jié)合的蛋白。種類(lèi)包括單克隆抗體和多克隆抗體。elisa試劑盒組成及試劑配制:1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔) 2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為1,600 pg/ml,將其稀釋為400 pg/ml后,再做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別稀釋成400 pg/ml,200 pg/ml,100 pg/ml,50 pg/ml,25 pg/ml,12.5 pg/ml,6.25 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。如配制200 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 400 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。3. 樣品稀釋液:1×20ml。4. 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。5. 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。6. 檢測(cè)溶液A:1×120μl(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液A 1:100稀釋?zhuān)♂屒案鶕?jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100μl/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl檢測(cè)溶液A加990μl檢測(cè)稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。7. 檢測(cè)溶液B:1×120μl/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A。8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 11. 覆膜:5張12. 使用說(shuō)明書(shū):1份 (6) TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液: TMB(10mg/5ml無(wú)水乙醇) 0.5ml 底物緩沖液(PH5.5) 10ml 0.75%H2O2 32μl 根據(jù)國(guó)家食品藥品管理局《藥品注冊(cè)管理辦法(試用)》的定義:藥品的標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品是指供具有確定特性量值,用于校準(zhǔn)設(shè)備、評(píng)價(jià)測(cè)量方法或供試藥賦值的物質(zhì)。對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品(對(duì)照品)因管理不善或超過(guò)使用期限導(dǎo)致其濃度降低,特別是標(biāo)準(zhǔn)品(對(duì)照品)貯備液和開(kāi)封過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)品(對(duì)照品)。當(dāng)然,如果有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)供應(yīng)充足或來(lái)源充足且價(jià)格低廉,還是使用有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)而不采用其他類(lèi)型的工作標(biāo)準(zhǔn),因?yàn)檫@樣可以提高測(cè)量結(jié)果的可信度。動(dòng)物脾臟有上百萬(wàn)種不同的B淋巴細(xì)胞系,具有不同基因不同的B淋巴細(xì)胞合成不同的抗體。
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