ELISA是一種敏感性高、特異性強、重復(fù)性好的實驗診斷方法，由于其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡便、結(jié)果判斷較客觀等因素，以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗又可以用于少量標(biāo)本的檢測，既可以做定性試驗也可以做定量分析等優(yōu)點，已廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)、寄生蟲學(xué)、腫瘤學(xué)和細(xì)胞因子等領(lǐng)域。
ELISA的影響因素較多，加強質(zhì)量管理才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點。
分析前質(zhì)控
●人員培訓(xùn)實驗是人操作的，因此檢驗人員需經(jīng)過培訓(xùn)，熟練掌握本專業(yè)如下幾方面的技術(shù)知識：
◎檢驗項目的基本原理（ELISA原理）；
◎臨床意義；
◎熟悉檢測技巧，了解易出差錯的環(huán)節(jié)及難點；
◎熟悉檢測試劑性能（包括試劑盒組成，包被片段及其組成）；
◎熟悉檢測儀器的原理及性能；掌握數(shù)據(jù)處理的能力和質(zhì)量控制知識。
◎某些特殊項目的檢測如抗HIV等需經(jīng)有關(guān)部門組織的專門培訓(xùn)班，考試合格后持證上崗。
分析前質(zhì)控◎ELISA原理：1971年Engvall等人把免疫組化的EIA技術(shù)應(yīng)用于臨床檢驗發(fā)展為ELISA技術(shù)。
特點：在固相表面組裝免疫活性物質(zhì)形成"免疫吸附劑" 酶標(biāo)記免疫活性物質(zhì)，進(jìn)行信號放大；
有二步溫育反應(yīng)二次洗滌過程；靈敏度特異性相對較高。局限性：只能檢測到ng水平
精密度差（批內(nèi)CV15-20%）；線性范圍窄（一個數(shù)量級）；存在"HD-HOOK"效應(yīng)。ELISA原理
●根據(jù)檢測目的和操作步驟不同有三種基本方法。
●雙抗體（原）夾心法檢測抗原（體）的常見方法，應(yīng)用針對抗原兩個不同決定族的兩種單
抗分別作為固相載體和酶標(biāo)抗體檢測溶液中的抗原（適用于二價以上抗原,不能測小分子半抗原）。
●間接法檢測抗體的方法，利用酶標(biāo)記的抗抗體（第二抗體）檢測已與固相抗原結(jié)合的抗體。
●競爭法檢測抗原或小分子半抗原、抗體，以測抗原為例，使待測抗原和酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合，結(jié)果如待測抗原含量越多，與固相抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗原就越少，顯色越淺，二者呈負(fù)相關(guān)。
ELISA原理今后的發(fā)展方向
●聚苯乙烯表面的制備。已有的技術(shù)是酰肼化（聚二氟乙叉，PVDF）；生物素化；預(yù)包被多聚賴氨酸等，均是產(chǎn)品。
●酶促信號放大的改變，如酶促熒光、酶促化學(xué)發(fā)光等。
ELISA臨床意義
●各型肝炎的特征及標(biāo)志物