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北京迪科馬科技有限公司(迪馬科技)

2020年國抽項(xiàng)目——茶葉中農(nóng)藥殘留的檢測

時間:2020-4-28 閱讀:6336
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2020年《國家食品安全監(jiān)督抽檢實(shí)施細(xì)則》(簡稱國抽)2019年相比,在茶葉的檢驗(yàn)項(xiàng)目中,刪除了除蟲脲、多菌靈、甲氰菊酯、滴滴涕和特丁硫磷的檢測,新增了內(nèi)吸磷、乙酰甲胺磷、丙溴磷、毒死蜱和莠去津的檢驗(yàn)項(xiàng)目

迪馬科技按照2020版國抽細(xì)則的要求,參考GB 23200.13-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 茶葉中448種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定 液相色譜-質(zhì)譜法》、GB/T 23204-2008 茶葉中519種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定 氣相色譜-質(zhì)譜法》、GB 23200.113-2018 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》、SN/T 4655-2016 出口食品中草甘膦及其代謝物殘留量的測定方法 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》等相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),采用SPE、QuEChERS結(jié)合GC-MSUPLC-MS/MS建立了一系列茶葉中農(nóng)藥殘留的檢測方法,系列方法中涵蓋了所有2020版國抽細(xì)則中茶葉檢驗(yàn)項(xiàng)目下的農(nóng)藥,可供廣大分析工作者參考!

方法一   SPE-UPLC-MS/MS

1、適用范圍

   本方法適用于茶葉中的克百威、滅多威、3-羥基克百威、茚蟲威、甲胺磷、氧樂果、啶蟲脒、吡蚜酮、吡蟲啉和內(nèi)吸磷(O+S)的檢測。

2、標(biāo)準(zhǔn)品配制

(1) 單標(biāo)儲備液1.0 mg/mL: 準(zhǔn)確稱取適量各標(biāo)準(zhǔn)品,用乙腈配制成1.0 mg/mL的單標(biāo)儲備液;

(2) 混標(biāo)儲備液5.0 μg/mL: 分別吸取各單標(biāo)儲備液,用乙腈配制成5.0 μg/mL混標(biāo)儲備液;

(3) 混標(biāo)中間液1.0 μg/mL: 吸取混標(biāo)儲備液,用乙腈配制成1.0 μg/mL混標(biāo)儲備液。

3、提取

(1) 10.0 g樣品,加入30 mL乙腈,振蕩5 min,6000 rpm離心5 min,取出上清液;

(2) 向下層殘?jiān)欣^續(xù)加入30 mL、20 mL乙腈,按照步驟(1)重復(fù)提取兩次;

(3) 合并三次提取液,在40 水浴中減壓蒸至1 mL,加入乙腈復(fù)溶,并轉(zhuǎn)移到具塞試管中定容至5 mL,取出1 mL,待凈化。

4、凈化—— ProElut TPC 12 mL (Cat.# 65354)

(1)活    化:

加入10 mL乙腈-甲苯(3-1)活化,棄去流出液;

(2)上    樣:

加入1 mL待凈化液,收集流出液;

(3)洗    脫:

加入25 mL乙腈-甲苯(3-1),收集流出液,合并(2)(3)流出液;

(4)重新溶解:

將流出液在40 水浴中旋轉(zhuǎn)濃縮至約0.5 mL,然后在室溫下用氮?dú)饩徛蹈?,?/font>1 mL甲醇溶解,上機(jī)分析。

:  同方法制備基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液

5、分析條件

UPLC 條件

色譜柱: Leapsil C18100 x 2.1 mm,2.7 μm (Cat#: 86005)

 : 0.4 mL/min    進(jìn)樣量: 1 μL   柱  溫: 35

流動相: A: 0.1%甲酸水    B: 乙腈

梯度設(shè)置

時間(Min)

0

3

6

7

8

10

11

17

A(%)

95

70

60

60

5

5

95

95

B(%)

5

30

40

40

95

95

5

5

 

質(zhì)譜條件

電離模式: ESI掃描方式: 正離子掃描

檢測方式: 多反應(yīng)監(jiān)測電噴霧電壓: 5500 V

霧化氣壓力: 50 psi輔助氣壓力: 50 psi

氣簾氣壓力: 20 psi離子源溫度: 500

 

定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓見下表

藥物名稱

定性離子對

定量離子對

碰撞氣能量/eV

去簇電壓/V

(m/z)

(m/z)

(母離子/子離子)

(母離子/子離子)

克百威

222.0/123.0

222.0/123.0

21

66

222.0/165.0

15

滅多威

163.0/88.0

163.0/88.0

8

30

163.0/106.0

15

3-羥基克百威

238.1/163.0

238.1/163.0

19

80

238.1/181.1

16

茚蟲威

528.1/249.1

528.1/249.1

23

90

528.1/218.2

30

甲胺磷

142.1/94.0

142.1/94.0

17

65

142.1/124.9

17

142.1/112.0

17

氧樂果

214.4/155.0

214.4/155.0

20

56

214.4/141.2

19

74

啶蟲脒

223.1/126.0

223.1/126.0

27

75

223.1/56.1

30

223.1/90.0

45

吡蚜酮

218.2/104.9

218.2/104.9

27

60

218.2/79.0

51

吡蟲啉

256.1/209.0

256.1/209.0

21

65

256.1/127.0

21

內(nèi)吸磷(O+S)

259.2/89.1

259.2/89.1

12

45

259.2/61.0

40

 

6、添加回收結(jié)果

1 綠茶中10種農(nóng)藥殘留檢測的添加回收結(jié)果(%)

目標(biāo)物

 

添加水平10 μg/kg

基質(zhì)效應(yīng)(%)基質(zhì)標(biāo)/溶劑標(biāo)

加標(biāo)量: 中間液混標(biāo)1.0 μg/mL, 100 μL

克百威

108

88.5

滅多威

114

158

3-羥基克百威

106

83.1

茚蟲威

120

101

甲胺磷

91.7

95.5

氧樂果

97.3

91.8

啶蟲脒

112

139

吡蚜酮

92.8

81.6

吡蟲啉

125

102

內(nèi)吸磷(O+S)

82

93

 

 

1 10種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品20.0 μg/LMRM色譜圖

 


 

2  10種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品20.0 μg/LXIC色譜圖


方法二   QuEChERS-UPLC-MS/MS

1、適用范圍

    本方法適用于茶葉中的克百威、滅多威、3-羥基克百威、茚蟲威、甲胺磷、乙酰甲胺磷、敵百蟲、氧樂果、啶蟲脒、吡蟲啉和內(nèi)吸磷(O+S)的檢測。

2、標(biāo)準(zhǔn)品配制

(1) 單標(biāo)儲備液1.0 mg/mL: 準(zhǔn)確稱取適量各標(biāo)準(zhǔn)品,用乙腈配制成1.0 mg/mL的單標(biāo)儲備液;

(2) 混標(biāo)儲備液5.0 μg/mL: 分別吸取各單標(biāo)儲備液,用乙腈配制成5.0 μg/mL混標(biāo)儲備液;

(3) 混標(biāo)中間液1.0 μg/mL: 吸取混標(biāo)儲備液,用乙腈配制成1.0 μg/mL混標(biāo)儲備液。

3、提取

(1) 2.0 g樣品,加入10 mL水混勻,浸泡30 min;

(2) 繼續(xù)加入15 mL 乙腈,振蕩5 min;

(3) 加入6 g 無水硫酸鎂和1.5 g乙酸鈉(Cat#: 64520S)振蕩1 min,6000 rpm離心5 min

(3) 取出8 mL上清液,待凈化

4、凈化——ProElut QuE 15 mL Tube (Cat#: 64622)

    將待凈化液加入到15 mL ProElut QuEChERS凈化管,渦旋混合1 min,6000 rpm離心5 min,準(zhǔn)確取2 mL上清液于5 mL氮吹管中,40 水浴中氮?dú)獯抵两桑?/font>加入1 mL甲醇,混勻,上機(jī)分析。

:  同方法制備基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液

5、分析條件

UPLC 條件

色譜柱: Leapsil C18,100 x 2.1 mm2.7 μm (Cat#: 86005)

 : 0.4 mL/min    進(jìn)樣量: 1 μL   柱  溫:  35

流動相: A: 0.1%甲酸水    B: 乙腈

梯度設(shè)置

時間(Min)

0

3

6

7

8

10

11

17

A(%)

95

70

60

60

5

5

95

95

B(%)

5

30

40

40

95

95

5

5

 

質(zhì)譜條件

電離模式: ESI掃描方式: 正離子掃描

檢測方式: 多反應(yīng)監(jiān)測電噴霧電壓: 5500 V

霧化氣壓力: 50 psi輔助氣壓力: 50 psi

氣簾氣壓力: 20 psi離子源溫度: 500

 

定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓見下表

藥物名稱

定性離子對

定量離子對

碰撞氣能量/eV

去簇電壓/V

(m/z)

(m/z)

(母離子/子離子)

(母離子/子離子)

克百威

222.0/123.0

222.0/123.0

21

66

222.0/165.0

15

滅多威

163.0/88.0

163.0/88.0

8

30

163.0/106.0

15

3-羥基克百威

238.1/163.0

238.1/163.0

19

80

238.1/181.1

16

茚蟲威

528.1/249.1

528.1/249.1

23

90

528.1/218.2

30

甲胺磷

142.1/94.0

142.1/94.0

17

65

142.1/124.9

17

142.1/112.0

17

乙酰甲胺磷

184.0/143.0

184.0/95.0

10

60

184.0/95.0

29

敵百蟲

256.9/109.0

256.9/109.0

22

80

256.9/127.0

20

氧樂果

214.4/155.0

214.4/155.0

20

56

214.4/141.2

19

74

啶蟲脒

223.1/126.0

223.1/126.0

27

75

223.1/56.1

30

223.1/90.0

45

吡蟲啉

256.1/209.0

256.1/209.0

21

65

256.1/127.0

21

內(nèi)吸磷(O+S)

259.2/89.1

259.2/89.1

12

45

259.2/61.0

40

6、添加回收結(jié)果

1 綠茶中11種農(nóng)藥殘留檢測的添加回收結(jié)果(%)

目標(biāo)物

添加水平50 μg/kg

基質(zhì)效應(yīng)(%)基質(zhì)標(biāo)/溶劑標(biāo)

加標(biāo)量:  中間液混標(biāo)1.0 μg/mL, 100 μL

克百威

89%

96%

滅多威

113%

303%

3-羥基克百威

82%

94%

茚蟲威

70%

102%

甲胺磷

77%

92%

乙酰甲胺磷

83%

134%

敵百蟲

83%

83%

氧樂果

91%

96%

啶蟲脒

97%

327%

吡蟲啉

105%

77%

內(nèi)吸磷(O+S)

78%

112%

 

 

1 11種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品13.3 μg/LMRM色譜圖

  


2  11種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品13.3 μg/LXIC色譜圖

 

方法三   SPE-GC-MS

1、適用范圍

    本方法適用于茶葉中內(nèi)吸磷(O+S)、滅線磷、甲拌磷、莠去津、氯唑磷、甲拌磷亞砜、甲拌磷砜、毒死蜱、三氯殺螨醇、水胺硫磷、丙溴磷、聯(lián)苯菊酯、氯氰菊酯和高效氯氰菊酯、氰戊菊酯和S-氰戊菊酯的檢測。

2、標(biāo)準(zhǔn)品配制

(1) 單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲備液: 準(zhǔn)確稱取各農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品于10 mL容量瓶中,用甲苯溶解,并定容至刻度;

(2) 混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液: 根據(jù)測定需要,吸取適量體積的單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲備液于50 mL容量瓶中,并用乙酸乙酯定容至刻度;

(3) 混合標(biāo)準(zhǔn)中間液1: 吸取5 mL混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液于10 mL容量瓶中,并用乙酸乙酯定容至刻度;

(4) 混合標(biāo)準(zhǔn)中間液2: 吸取1 mL混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液于10 mL容量瓶中,并用乙酸乙酯定容至刻度。

目標(biāo)化合物

濃度(μg/mL)

混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液

混合標(biāo)準(zhǔn)中間液1

混合標(biāo)準(zhǔn)中間液2

內(nèi)吸磷(O+S)

20

10

2.0

滅線磷

15

7.5

1.5

甲拌磷

10

5

1.0

莠去津

50

25

5.0

氯唑磷

10

5

1.0

甲拌磷亞砜

10

5

1.0

甲拌磷砜

10

5

1.0

毒死蜱

50

25

5.0

三氯殺螨醇

10

5

1.0

水胺硫磷

50

25

5.0

丙溴磷

50

25

5.0

聯(lián)苯菊酯

25

12.5

2.5

氯氰菊酯和高效氯氰菊酯

50

25

5.0

氰戊菊酯S-氰戊菊酯

20

10

2.0

3、提取

(1) 5.0 g樣品于50 mL離心管中,加入15 mL乙腈,振蕩5 min,8000 rpm離心5 min,收集上層清液;

(2) 向下層殘?jiān)性偌尤?/font>15 mL乙腈,按步驟(1)重復(fù)提取一次,合并上清液;

(3) 將上清液在40 水浴下減壓蒸至約1 mL,加入6 mL乙腈-甲苯(3-1)溶解,待凈化。

4、凈化——ProElut TPC 12 mL (Cat#: 65354)

(1)活    化:

加入10 mL乙腈-甲苯(3-1),棄去流出液;

(2)上    樣:

將待凈化液加入柱中,收集流出液;

(3)洗    脫:

加入25 mL乙腈-甲苯(3-1),合并(2)(3)流出液;

(4)重新溶解:

將洗脫液在40 水浴下減壓蒸干,用乙酸乙酯定容至1 mL,混勻,供GC-MS分析。

:  同方法制備基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液。

5、GC-MS條件

色譜柱: DM-5MS, 30 m × 0.32 mm × 0.25 μm (Cat.# 8231)

進(jìn)樣口溫度: 240

升溫程序: 初始溫度70 ,保持2 min,以25 /min升溫至150 ,再以3 /min升溫至200 ,再以8 /min升溫至280 ,保持12 min

載氣: 氦氣,柱流速: 1.46 mL/min

進(jìn)樣方式: 不分流進(jìn)樣

進(jìn)樣量: 1.0 μL

離子源溫度: 230

接口溫度: 280

溶劑延遲: 6 min

電子轟擊電離源(EI): 選擇離子監(jiān)測模式(SIM),分組監(jiān)測見表1

1 選擇離子監(jiān)測組表

通道

起始時間(min)

結(jié)束時間(min)

選擇離子(m/z)

1

9.70

11.20

158,200,242,88,115,171

2

11.60

13.90

260,121,231,88,114,170,200,215,173

3

14.50

15.50

161,257,285

4

17.90

20.00

125,153,97,314,258,286,139,141,250,136,121,230

5

23.00

25.00

339,374,297

6

28.00

30.00

181,166,165

7

32.00

43.87

181,152,180,167,225,419,125

 

6、添加回收結(jié)果

綠茶和紅茶中多種農(nóng)藥殘留量的GCMS檢測添加回收結(jié)果

目標(biāo)化合物

添加濃度(mg/kg)

(加標(biāo)量: 混合標(biāo)準(zhǔn)中間液1,加50 μL)

回收率(%)

添加濃度(mg/kg)

(加標(biāo)量: 混合標(biāo)準(zhǔn)中間液2,加50 μL)

回收率(%)

綠茶

紅茶

綠茶

紅茶

內(nèi)吸磷(O+S)

0.1

79.41

75.44

0.02

73.99

73.23

滅線磷

0.075

97.87

92.21

0.015

84.14

90.30

甲拌磷

0.05

93.09

77.50

0.01

87.64

75.28

莠去津

0.25

88.92

85.02

0.05

85.96

82.33

氯唑磷

0.05

98.33

91.77

0.01

87.96

87.74

甲拌磷亞砜

0.05

96.05

97.89

0.01

99.73

87.17

甲拌磷砜

0.05

99.10

93.79

0.01

86.00

84.28

毒死蜱

0.25

101.15

91.08

0.05

88.21

84.23

三氯殺螨醇

0.05

89.79

85.44

0.01

80.25

87.10

水胺硫磷

0.25

97.97

90.47

0.05

91.88

81.02

丙溴磷

0.25

95.46

85.85

0.05

83.23

77.98

聯(lián)苯菊酯

0.125

102.37

93.98

0.025

94.47

86.04

氯氰菊酯

高效氯氰菊酯

0.25

98.21

91.93

0.05

94.17

89.73

氰戊菊酯

S-氰戊菊酯

0.1

109.83

105.98

0.02

119.19

102.30

 

14種農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)(10 μg/mL)TIC

 

 

方法四   SPE-UPLC-MS/MS

1、適用范圍

    本方法適用于綠茶、花茶、鐵觀音、紅茶和普洱茶中氨甲基膦酸和草甘膦的檢測,定量限0.1 mg/kg

2、標(biāo)準(zhǔn)品配制

單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲備液: 準(zhǔn)確稱取各標(biāo)準(zhǔn)品,用水配制成1000 μg/mL的單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲備液。

混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)中間液: 分別吸取各單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲備液,用水配制成1.0 μg/mL、10 μg/mL50 μg/mL的混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)中間液。

3、提取

    1 g茶葉于50 mL離心管中,準(zhǔn)確加入10 mL水、10 mL二氯甲烷,振蕩10 min,超聲10 min,8000 rpm離心5 min,取5 mL上清液,待凈化。

4、凈化——ProElut GLY 6 mL (Cat.#:  65938)

(1)活  化:

依次加入5 mL甲醇、5 mL水,棄去流出液;

(2)上  樣:

將待凈化液加入柱中,棄去前3 mL流出液,收集后2 mL流出液,混勻,濾液過0.22 μm尼龍濾膜,上機(jī)分析。

: 同方法制備基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液。

5、UPLC-MS/MS條件

5.1 UPLC 條件

色譜柱: Dikma Polyamino HILIC, 150 × 2.0 mm, 5 μm (Cat.#: 99302)

 : 0.2 mL/min     進(jìn)樣量: 10 μL      柱  溫: 35

流動相: A: 乙腈     B: 5 mM乙酸銨溶液,氨水調(diào)節(jié)至pH=11

梯度設(shè)置:

Time(min)

0

2

2.1

8

8.1

15

A(%)

80

80

20

20

80

80

B(%)

20

20

80

80

20

20

 

5.2 質(zhì)譜條件

電離模式: ESI

掃描方式: 負(fù)離子掃描

檢測方式: 多反應(yīng)監(jiān)測     

電噴霧電壓: -4500 V

霧化氣壓力: 60 psi       

輔助氣壓力: 60 psi

氣簾氣壓力: 35 psi       

離子源溫度: 550

定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓見下表

目標(biāo)化合物

定性離子對

(m/z)

(母離子/子離子)

定量離子對

(m/z)

(母離子/子離子)

碰撞氣能量/eV

去簇電壓/V

氨甲基膦酸

109.9/62.8

109.9/62.8

-23

-53

109.9/78.9

-35

-51

草甘膦

167.8/62.8

167.8/62.8

-30

-50

167.8/81.0

-21

-31

6、添加回收結(jié)果

茶葉中氨甲基膦酸和草甘膦LC-MS/MS檢測添加回收結(jié)果

樣品

基質(zhì)

回收率(%)

添加水平: 0.1 mg/kg

添加水平: 1 mg/kg

添加水平: 5 mg/kg

加標(biāo)量: 1.0 μg/mL,加100 μL

加標(biāo)量: 10 μg/mL,加100 μL

加標(biāo)量: 50 μg/mL,加100 μL

氨甲基膦酸

草甘膦

氨甲基膦酸

草甘膦

氨甲基膦酸

草甘膦

綠茶

103

91

99

109

92

101

花茶

95

105

109

85

93

99

鐵觀音

84

81

83

94

80

100

紅茶

100

101

86

85

89

98

普洱茶

80

95

89

95

88

102

 

 

R^2 = 0.9990

標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度分別為: 10 ng/mL、50 ng/mL100 ng/mL、250 ng/mL500 ng/mL

 

 

 

R^2 = 0.9990

標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度分別為: 10 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL、250 ng/mL500 ng/mL

 

茶葉多種農(nóng)藥殘留的檢測相關(guān)產(chǎn)品信息:  

貨號

名稱

規(guī)格

標(biāo)準(zhǔn)品

來電咨詢

農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)品

多種規(guī)格

樣品前處理

65354

茶葉中農(nóng)殘檢測萃取柱 ProElut TPC

12 mL, 20/pk

64520s

QuEChERS 萃取鹽 6 g MgSO4,1.5 g NaOAc

50/pk

64622

15 mL 凈化管, 400mg PSA / 400mg C18 / 200mg Carb / 1200mg MgSO4

50/pk

65938

草甘膦檢測固相萃取柱  ProElut GLY

6 mL, 30/pk

244358

12管防交叉污染真空SPE萃取裝置

12

4803

1,3,6 mL柱管通用連接器

15/pk

4806

考克(控制流量)

15/pk

99011

真空/正壓兩用泵,無油

1/pk

99013

抽濾瓶套裝

(包括硅橡膠管2,2 L抽濾瓶及橡膠塞)

1/pk

30039

FitMax針頭式過濾器 Nylon

13 mm, 0.22 μm 100/pk

色譜柱及保護(hù)柱

86005

UHPLC/HPLC兼容色譜柱 Leapsil C18

100 x 2.1 mm, 2.7 μm  

8231

氣相毛細(xì)柱 DM-5MS

30 m × 0.32 mm × 0.25 μm

99302

Dikma Polyamino HILIC

150 x 2.0 mm, 5 μm

HPLC溶劑Ÿ緩沖鹽Ÿ離子對試劑

50101

乙腈  HPLC

4 L

50102

甲醇  HPLC

4 L

50104

乙酸乙酯  HPLC

4 L

50144

甲酸 HPLC

50 mL

通用色譜產(chǎn)品

52401B

瓶架/藍(lán)色(現(xiàn)貨)

50

52401A

瓶架/白色(現(xiàn)貨)

50

1034

樣品瓶(棕色/螺紋)

2 mL, 100/pk

1035

樣品瓶蓋/含墊(已經(jīng)組裝)

100/pk

H80465

HPLC 進(jìn)樣針

25 μL

紅色產(chǎn)品貨號#30039、#1034、#1035*……

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